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產(chǎn)品信息
| 適用范圍 | 試劑 |
|---|---|
| 使用方法 | （一） 細(xì)胞凍存 1. 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)液，加入 PBS 清洗細(xì)胞； 2. 去除 PBS，加入適量胰蛋白酶（覆蓋培養(yǎng)皿表面） 室溫孵育 2~3 min，把單層生長(zhǎng)細(xì) 胞消化下來； 3. 加入雙倍體積的完全培養(yǎng)基或胰酶終止劑終止細(xì)胞消化（如果凍存細(xì)胞為懸浮細(xì)胞 按照步驟 4-8 進(jìn)行操作）； 4. 將消化后的細(xì)胞懸液或者懸浮細(xì)胞液轉(zhuǎn)移至離心管中，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)； 5. 室溫 1000 rpm 離心 5 min；棄掉上清液。 6. 加入適量 4℃預(yù)冷的無(wú)血清細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞沉淀，制成細(xì)胞懸液（按照細(xì)胞密度和所 用細(xì)胞凍存管的尺寸計(jì)算所需凍存液的量，推薦凍存密度：5x105 至 1x107cells/mL。） 7. 將細(xì)胞分裝入凍存管中，每管 1～1.5 ml； 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱，凍存時(shí)間及操作 者； 8. 將凍存細(xì)胞放入-80℃冰箱，24h 后轉(zhuǎn)入移至液氮罐中長(zhǎng)期冷凍保存。 （二） 細(xì)胞復(fù)蘇 1. 將水浴鍋溫度調(diào)至 37℃，取出凍存管快速置于水浴鍋內(nèi)，晃動(dòng)凍存管直至管中凍存細(xì)胞 融化成液體； 2. 將溶解的細(xì)胞凍存懸液轉(zhuǎn)移至含有 5-10 倍體積完全培養(yǎng)基的離心管中，待凍存管中細(xì)胞 完全融化后，將凍存細(xì)胞懸液緩慢加入離心管中，輕輕混勻； 3. 室溫 1000 rpm 離心 5 min； 去除上清液，加入已回溫的完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，進(jìn)行細(xì) 胞計(jì)數(shù)，根據(jù)計(jì)數(shù)結(jié)果，取適量的細(xì)胞懸液接種到新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)； 4. 將復(fù)蘇好的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至 37℃，5% CO2 培養(yǎng)箱中，按常規(guī)方法培養(yǎng)。 |
| 注意事項(xiàng) | 1. 試劑包裝如有破損或滴漏，嚴(yán)禁使用。 2. 請(qǐng)遵守嚴(yán)格無(wú)菌的工作規(guī)范，操作過程避免污染。 3. 使用前應(yīng)詳細(xì)閱讀使用說明書，在有效期內(nèi)使用。 4. 本產(chǎn)品含有 DMSO，建議用戶在低溫條件下（4℃或冰上）進(jìn)行操作，凍存細(xì)胞后應(yīng)盡量 減少凍存細(xì)胞在外存放時(shí)間，盡快移入-80℃超低溫冰箱長(zhǎng)期保存。 5. 部分對(duì) DMSO 敏感的細(xì)胞，建議使用本產(chǎn)品前對(duì)其進(jìn)行試驗(yàn)性凍存、復(fù)蘇、培養(yǎng)，確認(rèn) 性能后再進(jìn)行正式凍存。 6. 該產(chǎn)品在室溫條件下放置的時(shí)間不宜過長(zhǎng)，以免影響凍存效率。 |
| 聲明 | 僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。 |
| 保存條件 | 2°C-8°C保存，有效期18個(gè)月。 |
產(chǎn)品詳情
BDBIO 無(wú)血清細(xì)胞凍存液（無(wú)酚紅）是一款即用型細(xì)胞凍存試劑。廣泛適用于多種哺乳動(dòng)物 細(xì)胞（腫瘤細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞）的凍存。產(chǎn)品經(jīng)過配方優(yōu)化、不含血清、動(dòng)物源成分，含有糖、 氨基酸、優(yōu)質(zhì)白蛋白等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和更低的 DMSO 含量配比。大大提高了細(xì)胞的復(fù)蘇率和活 力，可用于細(xì)胞長(zhǎng)期保存。本產(chǎn)品不僅可以避免使用血清，降低血清中未知成分和病毒等感 染物質(zhì)給凍存帶來的影響與風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí)，可省去繁瑣費(fèi)時(shí)的程序降溫過程，細(xì)胞可重懸于本 產(chǎn)品后直接置于-80℃冰箱長(zhǎng)期保存，或次日轉(zhuǎn)移到液氮完成整個(gè)凍存過程。
400-0592-051
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