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產(chǎn)品信息
| 適用范圍 | 試劑 |
|---|---|
| 使用方法 | （一） 細(xì)胞凍存 1. 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)液，加入 PBS 清洗細(xì)胞； 2. 去除 PBS，加入適量胰蛋白酶（覆蓋培養(yǎng)皿表面） 室溫孵育 2~3 min，把單層生長(zhǎng)細(xì) 胞消化下來(lái)； 3. 加入雙倍體積的完全培養(yǎng)基或胰酶終止劑終止細(xì)胞消化（如果凍存細(xì)胞為懸浮細(xì)胞 按照步驟 4-8 進(jìn)行操作）； 4. 將消化后的細(xì)胞懸液或者懸浮細(xì)胞液轉(zhuǎn)移至離心管中，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)； 5. 室溫 1000 rpm 離心 5 min；棄掉上清液。 6. 加入適量 4℃預(yù)冷的無(wú)血清干細(xì)胞專用凍存液重懸細(xì)胞沉淀，制成細(xì)胞懸液（按照細(xì)胞密 度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計(jì)算所需凍存液的量，推薦凍存密度：5x105- x107cells/mL）。 7. 將細(xì)胞分裝入凍存管中，每管 1～1.5 ml；在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱，凍存時(shí)間及操作 者； 8. 將凍存細(xì)胞放入-80℃冰箱保存，24h 后轉(zhuǎn)入移至液氮罐中長(zhǎng)期冷凍保存。 （二） 細(xì)胞復(fù)蘇 1. 將水浴鍋溫度調(diào)至 37℃，取出凍存管快速置于水浴鍋內(nèi)，晃動(dòng)凍存管直至管中凍存細(xì)胞 融化成液體； 2. 將溶解的細(xì)胞凍存懸液轉(zhuǎn)移至含有 5-10 倍體積完全培養(yǎng)基的離心管中，待凍存管中細(xì)胞 完全融化后，將凍存細(xì)胞懸液緩慢加入離心管中，輕輕混勻； 3. 室溫 1000 rpm 離心 5 min； 去除上清液，加入已回溫的完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，進(jìn)行細(xì) 胞計(jì)數(shù)，根據(jù)計(jì)數(shù)結(jié)果，取適量的細(xì)胞懸液接種到新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)； 4. 將復(fù)蘇好的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至 37℃，5% CO2 培養(yǎng)箱中，按常規(guī)方法培養(yǎng)。 |
| 注意事項(xiàng) | 1. 試劑包裝如有破損或滴漏，嚴(yán)禁使用。 2. 請(qǐng)遵守嚴(yán)格無(wú)菌的工作規(guī)范，操作過(guò)程避免污染。 3. 使用前應(yīng)詳細(xì)閱讀使用說(shuō)明書，在有效期內(nèi)使用。 4. 本產(chǎn)品含有 DMSO，建議用戶在低溫條件下（4℃或冰上）進(jìn)行操作，凍存細(xì)胞后應(yīng)盡量 減少凍存細(xì)胞在外存放時(shí)間，盡快移入-80℃超低溫冰箱長(zhǎng)期保存。 5. 部分對(duì) DMSO 敏感的細(xì)胞，建議使用本產(chǎn)品前對(duì)其進(jìn)行試驗(yàn)性凍存、復(fù)蘇、培養(yǎng)，確認(rèn) 性能后再進(jìn)行正式凍存。 6. 該產(chǎn)品在室溫條件下放置的時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，以免影響凍存效率。 |
| 聲明 | 僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。 |
| 保存條件 | 2°C-8°C保存，有效期18個(gè)月。 |
產(chǎn)品詳情
BDBIO 無(wú)血清干細(xì)胞專用凍存液是一款專門針對(duì)干細(xì)胞凍存而研發(fā)的凍存液，采用滲透性保 護(hù)劑、非滲透性保護(hù)劑、細(xì)胞沉降穩(wěn)定劑、細(xì)胞膜保護(hù)劑組合的方案對(duì)細(xì)胞進(jìn)行全方位低溫 保護(hù)，可使凍存過(guò)程中溶液冰點(diǎn)降低，提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性，使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透 出細(xì)胞，防止或減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷，同時(shí)降低冰凍時(shí)細(xì)胞周圍電解質(zhì)濃度，避免電解質(zhì) 損傷，還可以延緩凍存過(guò)程中細(xì)胞的互相擠壓，保護(hù)細(xì)胞膜，從而有效提高細(xì)胞復(fù)蘇率和活 力。本產(chǎn)品無(wú)需程序降溫，且無(wú)動(dòng)物成分、無(wú)血清，化學(xué)成分明確，可在穩(wěn)定干細(xì)胞細(xì)胞表 型和生長(zhǎng)狀態(tài)和保持細(xì)胞多能性的同時(shí)提供最佳的細(xì)胞回收效率。
此外 BDBIO 還提供含酚紅的無(wú)血清干細(xì)胞專用凍存液（#A402-500，#A402-100， #A402-50）以滿足不同的干細(xì)胞凍存需求。
400-0592-051
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