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產(chǎn)品信息
| 適用范圍 | 試劑 |
|---|---|
| 使用方法 | （一） 細胞凍存 1. 取對數(shù)生長期的細胞，去除舊培養(yǎng)液，加入 PBS 清洗細胞； 2. 去除 PBS，加入適量胰蛋白酶（覆蓋培養(yǎng)皿表面） 室溫孵育 2~3 min，把單層生長細 胞消化下來； 3. 加入雙倍體積的完全培養(yǎng)基或胰酶終止劑終止細胞消化（如果凍存細胞為懸浮細胞 按照步驟 4-8 進行操作）； 4. 將消化后的細胞懸液或者懸浮細胞液轉(zhuǎn)移至離心管中，進行細胞計數(shù)； 5. 室溫 1000 rpm 離心 5 min；棄掉上清液。 6. 加入適量 4℃預冷的無血清干細胞專用凍存液重懸細胞沉淀，制成細胞懸液（按照細胞密 度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存液的量，推薦凍存密度：5x105- x107cells/mL）。 7. 將細胞分裝入凍存管中，每管 1～1.5 ml；在凍存管上標明細胞的名稱，凍存時間及操作 者； 8. 將凍存細胞放入-80℃冰箱保存，24h 后轉(zhuǎn)入移至液氮罐中長期冷凍保存。 （二） 細胞復蘇 1. 將水浴鍋溫度調(diào)至 37℃，取出凍存管快速置于水浴鍋內(nèi)，晃動凍存管直至管中凍存細胞 融化成液體； 2. 將溶解的細胞凍存懸液轉(zhuǎn)移至含有 5-10 倍體積完全培養(yǎng)基的離心管中，待凍存管中細胞 完全融化后，將凍存細胞懸液緩慢加入離心管中，輕輕混勻； 3. 室溫 1000 rpm 離心 5 min； 去除上清液，加入已回溫的完全培養(yǎng)基重懸細胞，進行細 胞計數(shù)，根據(jù)計數(shù)結(jié)果，取適量的細胞懸液接種到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)； 4. 將復蘇好的細胞轉(zhuǎn)移至 37℃，5% CO2 培養(yǎng)箱中，按常規(guī)方法培養(yǎng)。 |
| 注意事項 | 1. 試劑包裝如有破損或滴漏，嚴禁使用。 2. 請遵守嚴格無菌的工作規(guī)范，操作過程避免污染。 3. 使用前應詳細閱讀使用說明書，在有效期內(nèi)使用。 4. 本產(chǎn)品含有 DMSO，建議用戶在低溫條件下（4℃或冰上）進行操作，凍存細胞后應盡量 減少凍存細胞在外存放時間，盡快移入-80℃超低溫冰箱長期保存。 5. 部分對 DMSO 敏感的細胞，建議使用本產(chǎn)品前對其進行試驗性凍存、復蘇、培養(yǎng)，確認 性能后再進行正式凍存。 6. 該產(chǎn)品在室溫條件下放置的時間不宜過長，以免影響凍存效率。 |
| 聲明 | 僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。 |
| 保存條件 | 2-8℃儲存，有效期18個月。 |
產(chǎn)品詳情
BDBIO 無血清干細胞專用凍存液是一款專門針對干細胞凍存而研發(fā)的凍存液，采用滲透性保 護劑、非滲透性保護劑、細胞沉降穩(wěn)定劑、細胞膜保護劑組合的方案對細胞進行全方位低溫 保護，可使凍存過程中溶液冰點降低，提高細胞膜對水的通透性，使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透 出細胞，防止或減少冰晶對細胞的損傷，同時降低冰凍時細胞周圍電解質(zhì)濃度，避免電解質(zhì) 損傷，還可以延緩凍存過程中細胞的互相擠壓，保護細胞膜，從而有效提高細胞復蘇率和活 力。本產(chǎn)品無需程序降溫，且無動物成分、無血清，化學成分明確，可在穩(wěn)定干細胞細胞表 型和生長狀態(tài)和保持細胞多能性的同時提供最佳的細胞回收效率。
此外 BDBIO 還提供含酚紅的無血清干細胞專用凍存液（#A402-500，#A402-100， #A402-50）以滿足不同的干細胞凍存需求。
