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首頁 > 細胞培養 > 細胞相關耗材 > 細胞凍存 > 細胞凍存液 > 百迪無血清細胞凍存液(無DMSO)500ml
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產品信息

適用范圍試劑
使用方法(一) 細胞凍存
1. 取對數生長期的細胞,去除舊培養液,加入 PBS 清洗細胞;
2. 去除 PBS,加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養皿表面) 室溫孵育 2~3 min,把單層生長細胞 消化下來;
3. 加入雙倍體積的完全培養基或胰酶終止劑終止細胞消化(如果凍存細胞為懸浮細胞按照步 驟 4-8 進行操作);
4. 將消化后的細胞懸液或者懸浮細胞液轉移至離心管中,進行細胞計數;
5. 室溫 1000 rpm 離心 5 min;棄掉上清液。
6. 加入提前預冷好的無血清免疫細胞專用凍存液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,調節凍存液 中細胞的最終密度為 5×105/ml-1×107/ml(供參考,可根據實際需求進行調整);
7. 將細胞分裝入凍存管中,每管 1~1.5 ml; 在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作 者;
8. 將凍存細胞放入-80℃冰箱,24h 后轉入移至-196℃液氮罐長期冷凍保存。(也可適用于 細胞的非程序化凍存及-80℃環境短期保存,更多類型細胞系的簡化操作需驗證后使用)。
(二) 細胞復蘇
1. 將水浴鍋溫度調至 37℃,取出凍存管快速置于水浴鍋內,晃動凍存管直至管中凍存細胞 融化成液體;
2. 將溶解的細胞凍存懸液轉移至含有 5-10 倍體積完全培養基的離心管中,待凍存管中細胞 完全融化后,將凍存細胞懸液緩慢加入離心管中,輕輕混勻;
3. 室溫 1000 rpm 離心 5 min; 去除上清液,加入已回溫的完全培養基重懸細胞,進行細 胞計數,根據計數結果,取適量的細胞懸液接種到新的培養瓶內;
4. 將復蘇好的細胞轉移至 37℃,5% CO2 培養箱中,按常規方法培養。
注意事項1. 試劑包裝如有破損或滴漏,嚴禁使用。
2. 請遵守嚴格無菌的工作規范,操作過程避免污染。
3. 本產品適用于多種細胞類型的凍存,凍存使用前可根據實驗需求進行驗證。
4. 使用前應詳細閱讀使用說明書,在有效期內使用。
聲明僅用于科研使用,不能用于臨床診斷和治療。
保存條件-20°C保存,有效期18個月。

產品詳情

BDBIO 無血細胞凍存液是一款化學成分明確的即用型細胞凍存試劑,經過配方特別優化,不 含血清、動物源成分及 DMSO 等,可避免 DMSO 引起的細胞毒性,同時保持細胞較高的活 力和生理活性。 適用于 DMSO 敏感的細胞系及免疫細胞、干細胞等不同類型細胞的冷凍保 存,并可保持干細胞的分化潛能。


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