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產品信息
| 適用范圍 | 試劑 |
|---|---|
| 使用方法 | 人多能干細胞培養基制備： 1. 將人多能干細胞基礎培養基提前恢復至室溫，添加劑解凍后翻轉混勻。 2. 然后將 10ml 添加劑無菌轉移到 490ml 人多能干細胞基礎培養基，混勻得到完全培養基。 3. 配制好的完全培養基可在 2°C-8°C 下儲存 2 周。 人多能干細胞復蘇： 1. 提前用基質膠包被 6 孔板，每孔內加入 1ml 基質膠輕輕晃動使其完全覆蓋皿底，置于 37℃培養箱中孵育 1h~2h，實驗前拿出并置于生物安全柜中室溫下平衡 20 min。 2. 將多能干細胞完全培養基提前預熱，取 5~10ml 加入 15ml 離心管中備用。 3. 將凍存的多能干細胞從液氮中取出，37°C 水浴中快速融化，當只剩下一塊小冰晶時，將凍存管從水浴中取出，噴灑 70%的乙醇，然后放在生物安全柜中。 4. 將解凍的細胞轉移到提前備好的含完全培養基的 15ml 離心管中，1000rpm 離心 3min。 5. 丟棄上清液，并將細胞沉淀重懸于 2ml 完全培養基混勻，將細胞懸液緩慢添加到基質膠包被的 6 孔板中，6 孔板的每個孔接種密度約 100 萬個活細胞。 6. 輕輕晃動 6 孔板使細胞均勻分布，置于 37℃，5%CO2 培養箱培養。 7. 第 2 天觀察細胞貼壁情況，更換新鮮培養基，此后每天更換培養基，直到細胞長至約 85% 匯合度。 人多能干細胞傳代： 1. 將人多能干細胞培養基及消化液提前預熱。 2. 棄掉原有培養基，貼壁緩慢加入 DPBS 清洗，然后沿培養皿邊緣吸去 DPBS 緩沖液。 3. 每孔加入 1-2ml 人多能干細胞消化液使之覆蓋皿底，并置于室溫孵育 5-8min 或在 37°C 下孵育 4-5min（消化時間依據干細胞生長密度，消化時間略有不同，消化過程中可在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若在顯微鏡下觀察到大部分克隆邊緣以及克隆內部細胞間出現間隙，即可吸掉消化液終止消化）。 4. 將消化液吸掉后，加入 2ml 人多能干細胞培養基，用移液槍輕柔吹打 3~5 次，使皿底干細胞集落脫落，并將其并轉移到 15mL 離心管中，少量殘余的細胞集落沒有脫落屬于正常現象。 5. 添加適當體積的預熱完全培養基到基質膠包被的 6 孔板中，將細胞懸浮液混勻后按一定比例接種至孔板中，輕輕晃動 6 孔板使細胞均勻分布，置于 37°C、5%CO2培養箱中培養過夜。 6. 第 2 天觀察細胞貼壁情況，更換新鮮培養基，此后每天更換培養基，直到細胞長至約 85% 匯合度。 人多能干細胞凍存： 1. 將人多能干細胞培養基及消化液提前預熱。 2. 棄掉原有培養基，貼壁緩慢加入 DPBS 清洗，然后沿培養皿邊緣吸去 DPBS 緩沖液。 3. 每孔加入 1-2ml 人多能干細胞消化液使之覆蓋皿底，并置于室溫孵育 5-8min，或在 37°C 下孵育 4-5min。 4. 將消化液吸掉后，加入 2mL 人多能干細胞培養基，用移液槍輕柔吹打 3~5 次，使皿底干細胞集落脫落，并將其并轉移到 15mL 離心管中，1000rpm 離心 3min。 5. 棄上清，加入無血清干細胞凍存液重懸，輕輕吹打混勻，轉入到凍存管中。 6. -80℃冰箱凍存過夜后轉入液氮中長期保存。 |
| 注意事項 | 1. 人多能干細胞培養基添加劑在室溫或 2-8℃解凍，避免反復凍融。 2. 配制好的人多能干細胞完全培養基可在 2°C-8°C 下儲存 2 周。 3. 傳代后可見細胞碎片和小菌落是正常現象。 4. 使用本產品時應嚴格按照無菌操作的規程進行操作。 |
| 聲明 | 僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。 |
| 保存條件 |
產品詳情
誘導多能干細胞 (iPSCs) 和胚胎干細胞 (ESC)，有時統稱為多能干細胞 (PSC)，是一種在適當微環境中具有無限自我更新能力和分化成幾乎任何細胞類型的細胞。這些獨特的性能使誘導多能干細胞和胚胎干細胞能夠應用于疾病建模、藥物發現、藥物毒性測試和細胞治療。
BDBIO 人多能干細胞培養基是一種無動物源組分，成分完全明確的無滋養層培養基，可替代Essential 8 培養基，適用于胚胎和誘導性人多能干細胞 (PSC) 的生長和擴增。
