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產品信息
| 適用范圍 | 試劑 |
|---|---|
| 使用方法 | UC-MSC 原代培養（組織塊法） 1. 配制 MSC 完全培養基，MSC 無血清培養基：MSC 培養基添加劑：青鏈雙抗=500ml：25ml：5ml，4℃保存，2 周內使用。 2. 無菌條件下取新鮮臍帶，用 DPBS 漂洗凈血跡。一般臍帶取得環境非無菌，可以稍微用75%酒精潤洗。 3. 置于 10 cm 培養皿中，剪成 1~2cm 臍段，剔除血管，用 DPBS 洗凈血跡，再剪成 1mm3 組織塊。 4. 用無菌滴管吸取少量細小組織塊均勻散布在 6 孔板 2 個孔中。 5. 37℃，5%CO 培養箱孵育 30min，以使組織塊粘貼在培養皿壁上。 5. 向每孔滴加 0.8 ml 完全培養基（注意沿孔壁小心滴加，勿使沖動組織塊）。 6. 37℃，5% CO2 培養箱孵育過夜，次日（D1）每孔再補加 1 ml 完全培養基。 7. 37℃，5% CO2 繼續培養，5 天（D6）后半量換液（此時一般看不到細胞，但最快 3 天就可看到細胞從組織邊沿爬出）。 8. 再過 5 天后半量換液（此時一般會有細胞爬出，但最晚可到 14 天會出現細胞從組織邊沿爬出）。 9. 每 2 天換一次培養液，繼續培養 2~4 天，待細胞密度達到約 80%后傳代培養。 注意事項：組織塊培養的關鍵是要保障組織塊始終貼壁，換液動作要盡可能輕微，避免沖動組織塊。培養基加量不能太多，以免組織塊漂浮。 UC-MSC 傳代培養與凍存 1. 待細胞融和度達到約 80%后進行傳代（細胞不能太密集，否則容易分化），吸棄孔板中的培養基，每孔加適量 DPBS 輕輕沖洗 1 次。 2. 根據培養皿適量加入重組胰酶-EDTA，在 37℃，5% CO2 培養箱作用 3~5 min（可輕拍培養瓶幫助細胞脫落）。 3. 顯微鏡下觀察細胞完全脫落后，使用 5ml MSC 無血清基礎培養基，1000 rpm 離心 3~5 min。 4. 謹慎吸出上清，細胞團塊用適當體積的完全培養基懸浮后，混勻細胞懸液。 5. 按照所需的比例進行傳代或按照 7000-8000cells/cm2 的細胞密度將細胞接種至培養器皿中，放入 37℃，5% CO2 培養箱內培養。 6. 每 2-3 天更換一次培養基，待細胞融合度達到 80%左右時，參照上述操作步驟 1~5 做細胞傳代；或者參照操作步驟 1~3 收獲細胞凍存。 7. 細胞凍存：將細胞團塊懸浮于適量無血清干細胞專用凍存液（無酚紅）中，裝入凍存管，2~8℃冰箱放置 30 min，-80℃冰箱放置 24 h，轉入液氮罐凍存。 |
| 注意事項 | 1. MSC 無血清基礎培養基和添加劑在室溫或 2-8℃解凍，避免反復凍融。 2. 本產品啟封前若有少量細小的凝聚物，是培養基成分的析出，屬于正常現象，可輕輕混勻后使用； 3. 使用本產品時應嚴格按照無菌操作的規程進行操作； |
| 聲明 | 僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。 |
| 保存條件 | 4℃ |
產品詳情
BDBIO 間充質干細胞（MSC）培養基是一款無血清、無異源成分的培養基，用于多種來源(即骨髓、脂肪組織、臍帶組織和牙髓) 間充質干細胞的生長和擴增，支持 MSC 的長期生長，同時保持其自我更新和多譜系分化潛力。
