Hi，歡迎來到海西儀器城！
- 登錄
- 注冊
- 手機版
APP StoreAndroid版 - 關注精藝
產品信息
| 適用范圍 | 試劑 |
|---|---|
| 使用方法 | MSC 無血清完全培養基配制： 將干細胞培養基添加劑按比例加入到 MSC 無血清基礎培養基中，混合均勻，即為人間充質 干細胞完全培養基，4℃保存，2 周內使用。原代（P0）分離時建議使用青鏈雙抗避免污染。 原代間充質干細胞分離（組織塊法） 1. 手術臺上取正常健康新生兒臍帶，浸泡于含雙抗的無菌生理鹽水或 PBS 中常溫或 4℃保 存； 2. 超凈臺內取出臍帶，用生理鹽水或者 PBS 洗去臍帶殘留血液，剪成 3-4cm 小段； 3. 用生理鹽水或者 PBS 再次清洗，用組織鑷去除臍帶中的 2 條臍動脈； 4. 沿臍靜脈將臍帶剪開，用組織鑷刮去靜脈，放入生理鹽水或者 PBS 中洗滌 2-3 次，剪成 1.5mm 左右大小。 5. 將剪好買的組織塊均勻鋪于培養皿中，間隔 5mm 左右。 6. 放置 5-10 分鐘后，根據所選培養容器添加相應量的培養基，放置于 37℃、5%CO2 培養 箱中培養； 7. 培養 3 天后，鏡下觀察有無細菌污染，進行半量換液； 8. 細胞培養至 7-10 天可見長梭形細胞從組織塊內爬出，7 天進行全換液，培養至 12-15 天可見大量細胞爬出，此時爬出的細胞記為 P0； 9. 待組織塊周邊細胞密度達到 80%-90%左右時，重組胰酶消化細胞進行傳代； 10. 傳代后的細胞記為 P1，以此類推。 人間充質干細胞傳代與凍存： 1. 待細胞融和度達到約 80%后進行傳代(細胞不能太密集，否則容易分化)，吸棄瓶中的培 養基，加適量 DPBS 輕輕沖洗 1 次。 2. 根據培養瓶適量加入溫和型細胞消化液，T175 建議使用 3-5ml，在室溫作用 1-3min (可輕拍培養瓶幫助細胞脫落)。 3. 顯微鏡下觀察細胞完全脫落后，用移液器輕輕吹打細胞，使細胞完全脫落，然后 1000 rpm 離心 3-5min。 4. 謹慎吸出上清，細胞團塊用適當體積的完全培養基懸浮后，混勻細胞懸液。 5. 按照 6000-8000cells/cm2 的細胞密度將細胞接種至 T175 培養瓶中加入 25ml 細胞懸 液，使其均勻的鋪在培養瓶底部，放入 37℃, 5% CO2 培養箱內培養。 6. 每 2-3 天更換一次培養基，待細胞融合度達到 80%左右時，進行細胞傳代操作或者收獲 細胞進行細胞凍存操作。 7. 細胞凍存: 將細胞團塊懸浮于適量無血清干細胞專用凍存液中，凍存液重懸細胞密度為 5*105-5*106 cells/ml；裝入凍存管，-80℃冰箱放置 24h，轉入液氮罐中長期凍存。 間充質干細胞復蘇： 1. 人間充質干細胞完全培養基提前預熱，在生物安全柜或超凈臺中吸取適量（如 T-75 瓶： 10-15mL)完全培養基沿上表面加入間充質干細胞培養瓶中，切勿沖到細胞培養瓶底面。 然后慢慢將細胞培養瓶平放，在 37℃、恒溫 CO2 培養箱中放置 5-10 分鐘后使用。可讓 培養基中的促貼壁物質更好地與細胞培養瓶底部結合，使間充質干細胞的貼壁能力增強， 降低“生長空洞”出現的概率。 2. 從液氮中取出凍存的間充質干細胞，迅速將凍存管放入 37℃水浴中，快速融解。 3. 用 70%-75%酒精消毒凍存管外壁，在生物安全柜或超凈臺中打開凍存管，將細胞懸液 緩慢移入裝有 5-10mL 完全培養基的離心管中。 4. 1200rpm 離心 5min，棄上清，加入 2mL 完全培養基重懸細胞，計數，按密度 6000- 8000 cells/cm2 將細胞接種至步驟 1 中孵育完的細胞培養瓶中，添加細胞時細胞懸液直 接加到底部，切忌沖到細胞培養瓶底面。 5. 輕輕搖晃細胞培養器瓶，使細胞均勻分布，混勻后，置于 37℃、5%CO2、飽和濕度的培 養箱中靜置培養。 6. 2-3 天后，更換新鮮的完全培養基。 |
| 注意事項 | 1. 本產品使用過程中應注意無菌操作，避免污染。 2. 試劑包裝如有破損或滴漏，嚴禁使用。 3. 為保持本產品的最佳使用效果，請勿進行凍融處理； 4. 本產品置于2～8℃，避光保存，禁止使用超出規定有效期的產品。 |
| 聲明 | 僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。 |
| 保存條件 | 2-8℃避光保存，有效期 12 個月。 |
產品詳情
BDBIO 間充質干細胞（MSC）無血清基礎培養基-普通款是一款無血清、無異源成分的培養 基，用于多種來源(即骨髓、脂肪組織、臍帶組織和牙髓) 間充質干細胞的原代分離及傳代培 養，具備保持間充質干細胞的多譜系分化潛能及維持其良好的增殖速率的特性。可根據實驗 需求搭配干細胞培養基添加劑使用。
S1013-500 MSC無血清基礎培養基-普通款（無酚紅）
