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首頁 > 細胞培養 > 細胞生物學(試劑) > 無血清及細胞治療系列產品 > 百迪免疫細胞無血清培養基1000ml
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產品信息

適用范圍試劑
使用方法免疫細胞無血清培養基用于激活擴增人 CIK 細胞:
1. 在免疫細胞無血清培養基中依次加入 INF-γ、IL-2 和 OKT3,可促使 CIK 細胞按照時間敏 感的方式在體外高效生長。
2. 第 1 天添加 INF-γ,促進和增強 IL -2 介導的細胞增殖。并且激活 PBMCs 中存在的單核 細胞,協同促進 CIK 細胞增殖并增加其細胞毒活性。推薦濃度為 1000IU/mL。
3. 第 2 天加入最終濃度為 500 IU/mL 的 IL-2,并在整個 14 天的培養期間持續補充,以誘導 CIK 細胞增殖和細胞溶解活性。
4. OKT3 在第 2 天添加,最終濃度為 50 ng/mL。OKT3 一種抗 cd3 抗體,通過 IL-2 依賴機 制刺激 CIK 增殖。
免疫細胞無血清培養基用于激活擴增人 NK 細胞:
1. 免疫細胞無血清培養基添加 100-200IU/ml 的 IL-2,確保 NK 細胞的增值和活化并有助 于提高細胞毒性,與 IL-15 聯合應用可促進 NK 細胞的增殖,有利于 NK 細胞的激活。
2. CD56 和 CD16 是人 NK 細胞的特異性標志物,可以通過磁珠細胞分選或流式細胞儀鑒 別和分離不受其它淋巴細胞污染的 NK 細胞。
免疫細胞無血清培養基用于激活擴增人 T 淋巴細胞:
1. 外周血單個核細胞(pbmc)或分選的 CD3+ T 細胞可用于 T 細胞培養,可使用商品化 T 細 胞分離試劑盒對 CD3+ T 細胞進行分選。
2. 建議在培養容器中播種密度為 1-2×106 個細胞/mL,低播種密度會導致 T 細胞激活失敗, 而高播種密度會降低激活效率。
3. 激活 T 細胞常用的方法有兩種:抗體涂層或 CD3/CD28 免疫磁珠激活。對于抗體包被, 細胞培養在含有 1mg /mL 抗 CD28 抗體和 200 IU/mL IL-2 的 581-10 培養基中; CD3/CD28 免疫磁珠活化利用免疫磁珠細胞分離技術,并加入 IL-2 以達到 1:1 的磁珠與 細胞比例。
免疫細胞無血清培養基用于激活擴增人 CAR-T 細胞:
1. 第一天,外周血單核細胞(PBMCs)采用密度梯度離心法用淋巴細胞分離液進行分離, CD3+ T 細胞根據商業化 T 細胞分離試劑盒提供的操作流程進行分離;
2. CD3+ T 細胞激活:CD3+ T 細胞用商業化抗 CD3/CD28 磁珠進行激活,培養基中需添 加 1000 IU/mL IL-2。
3. 慢病毒轉導:第 3 天慢病毒-CD19 CAR 轉導 CD3+T 細胞。
4. 細胞擴增 11-14 天,每 3-4 天加入含 IL-2 的 BD581-10 新鮮培養基,以 1×106 /mL 稀 釋細胞懸液,然后在第 13-14 天收集細胞。
注意事項1. 本產品不含 IL-2。由于免疫細胞的激活和生長依賴于外源性細胞因子如 IL-2,因此有必 要添加 IL-2,最終濃度為 200 至 1,000 IU/mL,具體取決于所研究的細胞類型。
2. 本產品無需添加自體血漿即可用于 CIK 和 T 細胞的培養;然而,加入低百分比熱滅活的 自體血漿已被證明可以提高激活效率和細胞擴增。我們建議加入 5%的自體血漿培養 CIK 細胞,2%的自體血漿培養 T 細胞。人自體血漿可被人 AB 血清取代。
聲明僅用于科研使用,不能用于臨床診斷和治療。
保存條件2-8℃保存,有效期 12 個月。

產品詳情

免疫細胞無血清培養基除含有可注射級的人血清白蛋白和重組人胰島素外,不存在其它蛋白 質成分,含抗生素(硫酸卡那霉素),酚紅作為 pH 值指示劑。專門用于 CIK(細胞因子誘導的殺傷細胞)和 DC-CIK(樹突狀細胞-細胞因子誘導的殺傷細胞)細胞的激活和擴增。通過適當的細胞因子和 抗體刺激,也可用于激活和擴增人 T 細胞、腫瘤浸潤淋巴細胞(TIL)、CAR-T 細胞、CAR-NK 細胞和 NK 細胞。推薦該培養基用于過繼免疫治療應用和細胞免疫反應實驗研究。


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