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產(chǎn)品信息
| 適用范圍 | 試劑 |
|---|---|
| 使用方法 | 根據(jù)血液樣本，分以下兩種情況： 情況 A：血液樣本量 0.5-2.0ml 時(shí)，實(shí)驗(yàn)方法如下： 1. 取一支 10ml 無菌硅化離心管，加入 4ml 分離液，再緩慢加入 0.5-2.0ml 血液樣本。血 液樣本小心加于分離液液界面之上。（分離液不得少于 3ml，血液樣本不得少于 0.5ml）； 2. 以 450g ，離心 30min。（注：如改變血液樣本及分離液用量，需相應(yīng)調(diào)整離心力及離 心時(shí)間。）； 3. 離心后，離心管中由上至下分為四層。第一層為血漿層。第二層為環(huán)狀乳白色（大/小鼠） 淋巴細(xì)胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細(xì)胞層。 4. 小心吸取血漿層轉(zhuǎn)移到新離心管中標(biāo)記為 A。小心吸取離心管中的環(huán)狀乳白色（大/小鼠） 淋巴細(xì)胞層轉(zhuǎn)移到新離心管中標(biāo)記為 B。 5. 向含有（大/小鼠）淋巴細(xì)胞的離心管 B 中，加入 10ml 清洗液，混勻細(xì)胞。 6. 250g，離心 10min，棄去上清。 7. 用吸管吸取 5ml 清洗液重懸所得細(xì)胞。 8. 250g，離心 10min，棄去上清。 9. 重復(fù)清洗兩次，棄去上清，用 0.5ml 清洗液或根據(jù)下一步實(shí)驗(yàn)需求加入相對應(yīng)液體，重 懸所得細(xì)胞。 情況 B：血液樣本量 2.0-4.0ml 時(shí)，實(shí)驗(yàn)方法如下： 1. 取 15ml 的無菌離心管，小心加入 5ml 分離液，加入血液樣本量 2.0-4.0ml。血液樣本 小心加于分離液界面之上。（總液體量不得超過 2/3） 2. 以 500g，離心 30min。（注：根據(jù)血液樣本量確定離心條件，血液量越多，離心力越 大，離心時(shí)間越長，具體離心條件需客戶自行摸索，以達(dá)到最佳分離效果。） 3. 離心后，離心管中由上至下分為四層。第一層為血漿層。第二層為環(huán)狀乳白色（大/小鼠） 淋巴細(xì)胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細(xì)胞層。 4. 小心吸取血漿層轉(zhuǎn)移到新離心管中標(biāo)記為 A。小心吸取離心管中的環(huán)狀乳白色（大/小鼠） 淋巴細(xì)胞層轉(zhuǎn)移到新離心管中標(biāo)記為 B 。 5. 向含有（大/小鼠）淋巴細(xì)胞的離心管 B 中，加入 10ml 清洗液，混勻細(xì)胞。 6. 250g，離心 10min，棄去上清。 7. 用吸管吸取 5ml 清洗液重懸所得細(xì)胞。 8. 250g，離心 10min，棄去上清。 9. 重復(fù)清洗兩次，棄去上清，用 0.5ml 清洗液或根據(jù)下一步實(shí)驗(yàn)需求加入相對應(yīng)液體，重 懸所得細(xì)胞。 分離過程中可能出現(xiàn)的情況及處理方案： 淋巴細(xì)胞層混雜紅細(xì)胞： 1. 吸取有紅細(xì)胞混雜的淋巴細(xì)胞層。 2. 取 15 毫升離心管加入紅細(xì)胞混雜的淋巴細(xì)胞，根據(jù)紅細(xì)胞殘余數(shù)量酌情加入 5-8 倍紅 細(xì)胞裂解液，少時(shí)多次裂解后獲得淋巴細(xì)胞。 |
| 注意事項(xiàng) | 1. 本產(chǎn)品使用前，請先顛倒混勻，并在無菌環(huán)境下打開使用。 2. 試劑包裝如有破損或滴漏，嚴(yán)禁使用。 3. 分離時(shí)最好不要使用高聚合材質(zhì)（如聚苯乙烯）的塑料制品,應(yīng)使用無靜電、低靜電離心 管及未經(jīng)堿處理過后的玻璃制品，避免細(xì)胞掛壁，影響分離效果。 4. 本產(chǎn)品嚴(yán)禁冷藏。低溫容易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果。 5. 為達(dá)到實(shí)驗(yàn)的最佳效果，推薦在取血 2h 內(nèi)分離，如達(dá)不到 2 小時(shí)內(nèi)分血條件，請務(wù)必 4 小時(shí)內(nèi)進(jìn)行分血步驟，超過 4 小時(shí)很難順利進(jìn)行分離。 6. 吸取過多的淋巴細(xì)胞層及分離液層會導(dǎo)致分離液交界處的粒細(xì)胞被吸出從而使混雜的粒 細(xì)胞數(shù)量增加。 7. 吸取過多的淋巴細(xì)胞層上層溶液會導(dǎo)致血漿蛋白及血小板混雜。 8. 不當(dāng)?shù)南♂尫椒〞档图?xì)胞得率及活性。稀釋液要求：不含鈣鎂離子的緩沖液或培養(yǎng)基。 血液樣本經(jīng)過稀釋則分離過程中需適當(dāng)降低離心力和離心時(shí)間。 9. 使用水平轉(zhuǎn)子離心機(jī)，離心機(jī)使用時(shí)調(diào)整為慢升慢降，建議升速的時(shí)間、降速時(shí)間均控 制在 3 分鐘左右。 10. 禁止使用超出規(guī)定有效期的產(chǎn)品。 |
| 聲明 | 僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。 |
| 保存條件 | 室溫避光儲存，有效期24個(gè)月。 |
產(chǎn)品詳情
外周血細(xì)胞包括白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板三類，而白細(xì)胞是粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞的 總稱。由于外周血中，不同血細(xì)胞的形態(tài)、大小以及比重不同，利用密度梯度離心法分離后， 至上而下分別為血漿層、外周血單核細(xì)胞層、淋巴細(xì)胞分離液層、紅細(xì)胞以及粒細(xì)胞層。 BDBIO 大（小）鼠外周血淋巴細(xì)胞分離液經(jīng)過一定的配方優(yōu)化和改良，和大（小）鼠外周血 近于等滲，對于淋巴細(xì)胞分離的提取率大于 80%。
