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產品信息

適用范圍試劑
使用方法直接適應
1. 預熱無血清培養基及添加劑,將添加劑按1:10的比例添加至無血清培養基,配制成雜交瘤完全培養基,雜交瘤細胞傳代至完全培養基。在適應過程中,細胞傳代密度應是正常傳代密度的兩倍。
2. 監測細胞生長,直到活細胞密度達到1×106個活細胞/mL。在新鮮預熱的雜交瘤完全培養基中傳代至活細胞密度為1-2×105個活細胞/mL。
3. 繼續監測和傳代細胞3-5代,細胞倍增時間不低于之前培養基時,認為此步驟培養基適應已經完成。
連續適應
1. 將原培養基與雜交瘤完全培養基以3:1的比例混合,雜交瘤細胞接種至新鮮預熱的混合后培養基。在適應過程中,傳代密度應是正常傳代密度的兩倍。
2. 監測細胞生長,直到活細胞密度達到1 × 106個活細胞/mL。將原培養基的比例逐步減少 (1:1,1:3,1:9),直至雜交瘤細胞接種于100%的雜交瘤完全培養基。傳代密度為1-2x105個活細胞/ml。
3. 繼續監測和傳代細胞,在100%完整的雜交瘤完全培養基中持續生長和存活幾代后,細胞倍增時間不低于之前培養基時,認為此步驟培養基適應已經完成。
蛋白表達
1. 雜交瘤細胞接種密度0.5-1×106 /mL, 培養溫度36.5~37.0℃,pH:7.1±0.2,DO: 40%。(搖床中建議轉速120rpm,振幅50mm, 5-8%CO2 )。
2. 第一次補料:當細胞密度達到2.5×106 /mL或培養48h時開始補第一次料:3%補料 +4mM谷氨酰胺,葡萄糖控制到4g/L;
3. 第二次補料:當培養至96h時補第二次料:3%補料+4mM谷氨酰胺,葡萄糖控制到4g/L;當細胞活率低于50%時,培養結束;
注意事項1. 本產品使用過程中應注意無菌操作,避免污染。
2. 試劑包裝如有破損或滴漏,嚴禁使用。
3. 為保持本產品的最佳使用效果,請勿進行凍融處理;
4. 禁止使用超出規定有效期的產品。
5. 由于本培養基含有谷氨酰胺,因此建議液體培養基超過3個月時補加2-4 mM谷氨酰胺。
聲明僅用于科研使用,不能用于臨床診斷和治療。
保存條件2℃-8°C避光保存,有效期12個月。

產品詳情

BDBIO 雜交瘤無血清培養基是一種無動物源,化學成分限定培養基。雜交瘤無血清培養基為初始培養基,含有4mM的谷氨酰胺,為雜交瘤細胞生長提供均衡的營養,與雜交瘤添加劑搭配使用可支持雜交瘤細胞的高密度培養。適用于人、小鼠和大鼠雜交瘤及骨髓瘤細胞的培養、單克隆抗體和重組蛋白的表達。


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