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產品信息
| 適用范圍 | 試劑 |
|---|---|
| 使用方法 | 直接適應 1. 預熱無血清培養(yǎng)基及添加劑，將添加劑按1：10的比例添加至無血清培養(yǎng)基，配制成雜交瘤完全培養(yǎng)基，雜交瘤細胞傳代至完全培養(yǎng)基。在適應過程中，細胞傳代密度應是正常傳代密度的兩倍。 2. 監(jiān)測細胞生長，直到活細胞密度達到1×106個活細胞/mL。在新鮮預熱的雜交瘤完全培養(yǎng)基中傳代至活細胞密度為1-2×105個活細胞/mL。 3. 繼續(xù)監(jiān)測和傳代細胞3-5代，細胞倍增時間不低于之前培養(yǎng)基時，認為此步驟培養(yǎng)基適應已經完成。 連續(xù)適應 1. 將原培養(yǎng)基與雜交瘤完全培養(yǎng)基以3：1的比例混合，雜交瘤細胞接種至新鮮預熱的混合后培養(yǎng)基。在適應過程中，傳代密度應是正常傳代密度的兩倍。 2. 監(jiān)測細胞生長，直到活細胞密度達到1 × 106個活細胞/mL。將原培養(yǎng)基的比例逐步減少 （1：1，1：3，1：9），直至雜交瘤細胞接種于100%的雜交瘤完全培養(yǎng)基。傳代密度為1-2x105個活細胞/ml。 3. 繼續(xù)監(jiān)測和傳代細胞，在100%完整的雜交瘤完全培養(yǎng)基中持續(xù)生長和存活幾代后，細胞倍增時間不低于之前培養(yǎng)基時，認為此步驟培養(yǎng)基適應已經完成。 蛋白表達 1. 雜交瘤細胞接種密度0.5-1×106 /mL， 培養(yǎng)溫度36.5~37.0℃，pH:7.1±0.2，DO： 40%。（搖床中建議轉速120rpm，振幅50mm, 5-8%CO2 ）。 2. 第一次補料：當細胞密度達到2.5×106 /mL或培養(yǎng)48h時開始補第一次料：3%補料 +4mM谷氨酰胺，葡萄糖控制到4g/L； 3. 第二次補料：當培養(yǎng)至96h時補第二次料：3%補料+4mM谷氨酰胺，葡萄糖控制到4g/L；當細胞活率低于50%時，培養(yǎng)結束； |
| 注意事項 | 1. 本產品使用過程中應注意無菌操作，避免污染。 2. 試劑包裝如有破損或滴漏，嚴禁使用。 3. 為保持本產品的最佳使用效果，請勿進行凍融處理； 4. 禁止使用超出規(guī)定有效期的產品。 5. 由于本培養(yǎng)基含有谷氨酰胺，因此建議液體培養(yǎng)基超過3個月時補加2-4 mM谷氨酰胺。 |
| 聲明 | 僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。 |
| 保存條件 | 2℃-8°C避光保存，有效期12個月。 |
產品詳情
BDBIO 雜交瘤無血清培養(yǎng)基是一種無動物源，化學成分限定培養(yǎng)基。雜交瘤無血清培養(yǎng)基為初始培養(yǎng)基，含有4mM的谷氨酰胺，為雜交瘤細胞生長提供均衡的營養(yǎng)，與雜交瘤添加劑搭配使用可支持雜交瘤細胞的高密度培養(yǎng)。適用于人、小鼠和大鼠雜交瘤及骨髓瘤細胞的培養(yǎng)、單克隆抗體和重組蛋白的表達。
