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產(chǎn)品信息
| 適用范圍 | 試劑 |
|---|---|
| 使用方法 | 【適用儀器】 顯微鏡、二氧化碳細(xì)胞培養(yǎng)箱、離心機(jī)。 【樣本要求】 新鮮骨髓穿刺液效果最佳，若樣本無(wú)法立即接種，將樣本放于2℃-8℃保存，并于3天內(nèi)接種， 超過(guò)3天將影響培養(yǎng)效果。 【檢驗(yàn)方法】 1. 接種：每5ml或10ml培養(yǎng)基中加入0.2-0.8ml的骨髓穿刺液樣本，輕輕搖晃培養(yǎng)瓶使樣本 與培養(yǎng)基充分混合。 2. 培養(yǎng)：置于37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24-48小時(shí)。 3. 終止培養(yǎng)：向每個(gè)培養(yǎng)瓶中加入秋水仙素溶液，始終濃度為0.05-0.1μg/ml，輕輕搖勻后， 放入培養(yǎng)中靜置1-2小時(shí)。 4. 收獲細(xì)胞：將培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移至離心管中，1500rpm離心10分鐘。 5. 低滲：棄去上清液，加入37℃預(yù)溫的0.075 mol/L的KCl低滲液8-10ml，混勻使細(xì)胞重 新懸浮，37℃孵化25-35分鐘。 6. 預(yù)固定：以冰醋酸：甲醇=1：3的比例配置固定液。每個(gè)離心管中加入1-2ml的固定液， 充分混勻后1500rpm離心10分鐘。 7. 固定：棄去上清，每個(gè)離心管中加入8ml的固定液，充分混勻后靜置20-30分鐘，隨后 1500rpm離心10分鐘。 8. 再次固定：棄去上清，每個(gè)離心管中加入8ml的固定液，充分混勻后靜置10分鐘，隨后 1500rpm離心10分鐘。并重復(fù)該步驟一次。 9. 制片：將固定后的細(xì)胞懸液調(diào)至合適的濃度滴于用冰水預(yù)冷的載玻片上，每張載玻片上 滴2-3滴，可通過(guò)酒精燈外延5-6秒或者用口輕輕吹散。放入80℃烤箱中烤片2~3小時(shí)， 或50℃過(guò)夜烤片。 10. 染色體分帶：玻片從烤箱中取出，室溫冷卻后可進(jìn)行G顯帶和R顯帶分型，吉姆薩染液染 色后顯微鏡下觀察進(jìn)行染色體核型分析。 【陽(yáng)性判斷值或者參考區(qū)間】 細(xì)胞倍增指數(shù)大于2 【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】 1. 固定液每次使用必須新鮮配制，否則將會(huì)形成酯類(lèi)，形成背景較為明顯，從而影響制片 效果； 2. 當(dāng)遇到經(jīng)過(guò)多次放療、化療和藥物治療的病人，重復(fù)兩次標(biāo)本都缺乏有絲分裂相，可能 是病人本身原因造成的。 3. 細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間、加入秋水仙酰胺的量以及低滲操作時(shí)間會(huì)影響樣品制備效果，需要根據(jù) 實(shí)際樣本及實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。 【檢驗(yàn)方法的局限性】 僅用于培養(yǎng)骨髓細(xì)胞。 |
| 注意事項(xiàng) | 1. 細(xì)胞密度以2×106/ml左右為宜。 2. 短期內(nèi)可放4-8℃保存，若長(zhǎng)期儲(chǔ)存，應(yīng)放-10℃至-20℃保存，不可反復(fù)凍融。 3. 本產(chǎn)品只用于體外診斷，操作過(guò)程應(yīng)避免污染；操作人員在檢驗(yàn)時(shí)應(yīng)做好防護(hù)，預(yù)防疾 病傳播。 4. 試劑包裝如有破損或滴漏，嚴(yán)禁使用。 5. 溶液應(yīng)為澄清，如有沉淀物，嚴(yán)禁使用。 6. 禁止使用超出規(guī)定有效期的產(chǎn)品。 |
| 聲明 | 僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。 |
| 保存條件 | 培養(yǎng)基應(yīng)在-20℃避光儲(chǔ)存，有效期為24個(gè)月。 |
產(chǎn)品詳情
主要組成成分:RPMI-1640培養(yǎng)基、胎牛血清、抗生素、肝素鈉、碳酸氫鈉、純化水。
檢驗(yàn)原理：新鮮骨髓樣本在骨髓細(xì)胞培養(yǎng)基中短暫培養(yǎng)后，加入有絲分裂抑制劑，使細(xì)胞有絲分裂停留 在中期，通過(guò)染色體顯帶技術(shù)對(duì)染色體進(jìn)行分析、比較、排序和編號(hào)，判定是否存在染色體 數(shù)目或形態(tài)結(jié)構(gòu)異常，從而在一定程度上診斷染色體疾病。
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