產品概述 來源 小鼠睪丸  形態 上皮細胞樣  培養 DMEM+10% FBS+1% P/S；空氣，95% ； 二氧化碳 (CO2)，5%  傳代 1:2-1:4（具體情況視細胞生長速度及密度決定）  產品簡介 15P-1細胞是從在生精上皮細胞中表達多瘤病毒（PyLT）的大T蛋白的轉基因小鼠睪丸細胞中建立的。15P-1細胞表現出支持細胞的特征，包括Wilms腫瘤（WT1）基因和Steel基因的轉錄。15P-1細胞通過膠乳珠的吞噬和死亡細胞的處理可以證實其具有吞噬活性，與生殖細胞的相互作用可以增強15P-1細胞的吞噬活性。在二倍體減數分裂前生殖細胞與表達精蛋白（Prm-1）基因的單倍體精細胞的共培養中，細胞可以進行減數分裂和減數分裂后的分化。當從未成熟的9日齡動物中移植的睪丸細胞與15P-1細胞共培養時，在第一次減數分裂開始之前，睪丸細胞可以產生具有圓形精細胞形態的單倍體細胞四分體，并啟動精蛋白轉錄。15P-1細胞分泌具有廣譜抗菌活性的蛋白酶敏感物質，在富含圓形精細胞和神經生長因子的組分存在下，15P-1培養基中抗菌物質的活性增加10倍至50倍。支持細胞和15P-1細胞都可以表達KL蛋白，一種Kit受體的配體。15P-1細胞可以用于3D細胞培養。  收貨指南 1. T25細胞瓶到貨后處理方案：

（1） 驗貨：培養瓶上標簽、培養瓶完好性以及瓶口是否有漏液；

（2） 處置：75%酒精對培養瓶消毒后，放入37℃，5% CO2的培養箱靜置培養2-4小時后，進行顯微觀察、拍照，作為售后維權依據；

（3） 注意：貼壁細胞在運輸過程中發生細胞脫落，這是正常現象，靜置后可恢復貼壁。

2. 凍存管到貨后處理方案：

（1） 驗貨：包裝的標簽、包裝內是否有干冰、凍存管完好性；

（2） 處置：盡快復蘇（見培養方法）或程序降溫后轉移至液氮中保存。

  培養方法 對于懸浮細胞：

1. 若離心對細胞影響不大，可將細胞懸浮液收集在試管中；

2. 150x g離心5分鐘，棄上清；

3. 加入新鮮培養液，按1∶2或1∶3的比例分裝到2或3個培養瓶中（具體情況視細胞生長速度及密度決定）；

或：

1. 若離心對細胞影響大，培養瓶直立靜置半小時左右，待大部分細胞都沉降到細胞瓶底，吸出1/2~2/3的舊培養基；

2. 加入新鮮培養液，按1∶2或1∶3的比例分裝到2或3個培養瓶中（具體情況視細胞生長速度及密度決定），再逐瓶加入新鮮培養基。

對于貼壁細胞：

1. 盡量吸干凈T25瓶原培養基；

2. 加3-4mL 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s，吸走潤洗的PBS；

3. T25瓶加1mL左右胰酶，輕輕晃動培養瓶以使胰酶鋪勻瓶底細胞層；

4. 將培養瓶放入37度培養箱消化；

5. 消化到細胞間隙變大，但未完全脫落時加2-3mL完全培養基終止胰酶消化；

6. 混勻細胞，900rpm離心3-5min，棄上清；

7. 加新的完全培養基輕輕重懸細胞，均勻分到新的培養瓶里；

8. 補足完全培養基，將培養瓶放回培養箱靜置培養。  生物安全等級 1

請在無菌環境中操作，避免污染；

為了保護細胞的穩定性，細胞傳代次數不宜過多；

為了結果的可靠性，實驗前請確認細胞狀態良好；

嚴格遵守生物安全操作規程。

  免責聲明 本產品僅用于科研目的，不得用于臨床診斷、治療等用途。用戶應遵循國家和地區的法律法規，自行承擔使用本產品所產生的一切風險和責任。

請在使用前仔細閱讀本說明書，并按照指導操作。如有任何疑問或需要進一步信息，請與我們聯系。

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