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產(chǎn)品概述
| 來(lái)源 | 乳腺 |
|---|---|
| 形態(tài) | 貼壁、上皮樣 |
| 培養(yǎng) | 高糖DMEM+10%FBS 37℃ 5%CO2 |
| 傳代 | 0.25%胰蛋白酶消化1-3min，比例1:2-1:3 |
| 產(chǎn)品簡(jiǎn)介 | 人乳腺癌細(xì)胞 (Human breast cancer cell) MCF-7是從一名69歲的白人女性乳腺癌患者的胸腔積液中分離得到，為貼壁上皮樣細(xì)胞，常用于乳腺癌生物學(xué)研究，乳腺癌抗癌藥物篩選等方面研究。 |
| 收貨指南 | 1. T25細(xì)胞瓶到貨后處理方案： （1） 驗(yàn)貨：培養(yǎng)瓶上標(biāo)簽、培養(yǎng)瓶完好性以及瓶口是否有漏液； （2） 處置：75%酒精對(duì)培養(yǎng)瓶消毒后，放入37℃，5% CO2的培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)后，進(jìn)行顯微觀(guān)察、拍照，作為售后維權(quán)依據(jù)； （3） 注意：貼壁細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中發(fā)生細(xì)胞脫落，這是正常現(xiàn)象，靜置后可恢復(fù)貼壁。 2. 凍存管到貨后處理方案： （1） 驗(yàn)貨：包裝的標(biāo)簽、包裝內(nèi)是否有干冰、凍存管完好性； （2） 處置：盡快復(fù)蘇（見(jiàn)培養(yǎng)方法）或程序降溫后轉(zhuǎn)移至液氮中保存。 |
| 培養(yǎng)方法 | 1.培養(yǎng)基： 88%MEM培養(yǎng)基；10%胎牛血清(FBS)；1%青霉素-鏈霉素 (P/S)；其他細(xì)胞添加劑 2.復(fù)蘇: (1)解凍:用鑷子將凍存管浸于37℃水浴；反復(fù)搖晃，迅速完成解凍； (2)離心:噴灑75%酒精消毒后，在無(wú)菌環(huán)境下，打開(kāi)凍存瓶，用移液器將細(xì)胞連同凍存液移至含1 mL完全培養(yǎng)基的10 mL離心管中，室溫1200 rpm離心3-5 min，細(xì)胞沉于離心管底部； (3)培養(yǎng):將上清液輕輕棄去，加2 mL完全培養(yǎng)基，輕柔懸起細(xì)胞，然后將所有細(xì)胞懸液移至含有3 mL完全培養(yǎng)基的T25培養(yǎng)瓶中，于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； (4)觀(guān)察:每日觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)(培養(yǎng)基顏色、細(xì)胞貼壁情況、形態(tài)與密度等) 并拍照。 3.傳代: 細(xì)胞密度達(dá)80%-90%開(kāi)始傳代 (1)清洗:無(wú)菌下吸出培養(yǎng)基，用37℃預(yù)熱的PBS清洗一次； (2)消化:加1 mL 0.25%胰蛋白酶消化液，轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶令其浸潤(rùn)所有細(xì)胞，室溫(或37℃)消化，顯微鏡下觀(guān)察到細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回超凈臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1 mL完全培養(yǎng)基終止消化； (3)離心:用移液器輕柔吹勻后然后將懸液轉(zhuǎn)移至10 mL離心管中，在1200 rpm離心3-5 min； (4)培養(yǎng):無(wú)菌下棄上清液，加1 mL完全培養(yǎng)基懸起細(xì)胞并移至T25培養(yǎng)瓶中；按1:2-1:3比例添加完全培養(yǎng)基，用移液器輕柔吹勻后，分裝至培養(yǎng)瓶中，于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 |
| 生物安全等級(jí) | 1請(qǐng)?jiān)跓o(wú)菌環(huán)境中操作，避免污染；為了保護(hù)細(xì)胞的穩(wěn)定性，細(xì)胞傳代次數(shù)不宜過(guò)多；為了結(jié)果的可靠性，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好；嚴(yán)格遵守生物安全操作規(guī)程。 |
| 免責(zé)聲明 | 本產(chǎn)品僅用于科研目的，不得用于臨床診斷、治療等用途。用戶(hù)應(yīng)遵循國(guó)家和地區(qū)的法律法規(guī)，自行承擔(dān)使用本產(chǎn)品所產(chǎn)生的一切風(fēng)險(xiǎn)和責(zé)任。請(qǐng)?jiān)谑褂们白屑?xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)，并按照指導(dǎo)操作。如有任何疑問(wèn)或需要進(jìn)一步信息，請(qǐng)與我們聯(lián)系。 |
產(chǎn)品詳情
400-0592-051
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