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產品概述
| 來源 | 肝 |
|---|---|
| 形態 | 貼壁、上皮樣 |
| 培養 | MEM培養基+10%FBS+1%NEAA 37℃ 5%CO2 |
| 傳代 | 0.25%胰蛋白酶消化1-3min，比例1:2-1:3 |
| 產品簡介 | 人肝癌亞力山大細胞（ The human hepatoma cell line）PLC/PRF/5是從肝癌供體肝臟中分離得到的亞歷山大細胞株，該細胞系曾被支原體污染，經BM-cycline 去除支原體。細胞分泌乙肝病毒表面抗原（HBsAg）。細胞貼壁生長、上皮樣，可3D培養。廣泛用于研究乙型肝炎病毒HBV感染的肝癌發生機制，抗HBV疫苗所需的HBsAg顆粒的制備等。 |
| 收貨指南 | 1. T25細胞瓶到貨后處理方案： （1） 驗貨：培養瓶上標簽、培養瓶完好性以及瓶口是否有漏液； （2） 處置：75%酒精對培養瓶消毒后，放入37℃，5% CO2的培養箱靜置培養2-4小時后，進行顯微觀察、拍照，作為售后維權依據； （3） 注意：貼壁細胞在運輸過程中發生細胞脫落，這是正常現象，靜置后可恢復貼壁。 2. 凍存管到貨后處理方案： （1） 驗貨：包裝的標簽、包裝內是否有干冰、凍存管完好性； （2） 處置：盡快復蘇（見培養方法）或程序降溫后轉移至液氮中保存。 |
| 培養方法 | 1.培養基： 89%MEM 培養基；10% 胎牛血清（FBS）；1%NEAA ；1%青霉素-鏈霉素（P/S）。 2. 復蘇： （1）解凍：用鑷子將凍存管浸于37 ℃水浴；反復搖晃，迅速完成解凍； （2）離心：噴灑75%酒精消毒后，在無菌環境下，打開凍存瓶，用移液器將細胞連同凍存液移至含1 mL完全培養基的10 mL離心管中，室溫1200 rpm離心3-5 min，細胞沉于離心管底部； （3）培養：將上清液輕輕棄去，加2 mL完全培養基，輕柔懸起細胞，然后將所有細胞懸液移至含有3 mL完全培養基的T25培養瓶中，于37 ℃，5% CO2培養箱中培養； （4）觀察：每日觀察細胞生長狀態（培養基顏色、細胞貼壁情況、形態與密度等）并拍照。 3. 傳代： 細胞密度達80%-90%開始傳代 （1）清洗：無菌下吸出培養基，用37 ℃預熱的PBS清洗一次； （2）消化：加1 mL 0.25%胰蛋白酶消化液，轉動培養瓶令其浸潤所有細胞，室溫（或37 ℃）消化，顯微鏡下觀察到細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回超凈臺，輕敲幾下培養瓶后加1 mL完全培養基終止消化； （3）離心：用移液器輕柔吹勻后然后將懸液轉移至10 mL離心管中，在1200 rpm離心3-5 min； （4）培養：無菌下棄上清液，加1 mL完全培養基懸起細胞并移至T25培養瓶中；按1∶ 3-1∶ 4比例添加完全培養基，用移液器輕柔吹勻后，分裝至培養瓶中，于37 ℃，5% CO2培養箱中培養。 |
| 生物安全等級 | 1請在無菌環境中操作，避免污染；為了保護細胞的穩定性，細胞傳代次數不宜過多；為了結果的可靠性，實驗前請確認細胞狀態良好；嚴格遵守生物安全操作規程。 |
| 免責聲明 | 本產品僅用于科研目的，不得用于臨床診斷、治療等用途。用戶應遵循國家和地區的法律法規，自行承擔使用本產品所產生的一切風險和責任。請在使用前仔細閱讀本說明書，并按照指導操作。如有任何疑問或需要進一步信息，請與我們聯系。 |
產品詳情
