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產品概述
| 來源 | 骨;成骨細胞 |
|---|---|
| 形態(tài) | 貼壁、上皮樣 |
| 培養(yǎng) | DMEM/F12+10%FBS 33.5℃ 5%CO2 |
| 傳代 | 0.25%胰蛋白酶消化1-2min，比例1:2-1:3 |
| 產品簡介 | 人SV40轉染成骨細胞 (Human osteoblast cells) hFOB 1.19是在0.6mg/mL新霉素G418存在下，用溫度敏感的表達載體pUCSVisA58轉染自然流產的胎兒四肢組織建立的細胞系，細胞貼壁生長，呈現(xiàn)上皮樣，廣泛應用于建立成骨發(fā)育不全的病理模型、發(fā)病機制以及成骨細胞誘導分化等研。 |
| 收貨指南 | 1. T25細胞瓶到貨后處理方案： （1） 驗貨：培養(yǎng)瓶上標簽、培養(yǎng)瓶完好性以及瓶口是否有漏液； （2） 處置：75%酒精對培養(yǎng)瓶消毒后，放入33.5℃，5% CO2的培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)2-4小時后，進行顯微觀察、拍照，作為售后維權依據； （3） 注意：貼壁細胞在運輸過程中發(fā)生細胞脫落，這是正常現(xiàn)象，靜置后可恢復貼壁。 2. 凍存管到貨后處理方案： （1） 驗貨：包裝的標簽、包裝內是否有干冰、凍存管完好性； （2） 處置：盡快復蘇（見培養(yǎng)方法）或程序降溫后轉移至液氮中保存。 |
| 培養(yǎng)方法 | 1.培養(yǎng)基： DMEM /F12 培養(yǎng)基；10% 胎牛血清 (FBS); 1%青霉素-鏈霉素(P/S);其他生長添加劑。 2.復蘇： (1)解凍：用鑷子將凍存管浸于37 ℃水浴;反復搖晃，迅速完成解凍； (2)離心： 噴灑75%酒精消毒后，在無菌環(huán)境下，打開凍存瓶，用移液器將細胞連同凍存液移至含 1 mL完全培養(yǎng)基的10 mL離心管中，室溫1200 rpm離心3-5 min，細胞沉于離心管底部； (3)培養(yǎng)：將上清液輕輕棄去，加2 mL完全培養(yǎng)基，輕柔懸起細胞，然后將所有細胞懸液移至含有3 mL完全培養(yǎng)基的T25培養(yǎng)瓶中，于33.5℃，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； (4)觀察：每日觀察細胞生長狀態(tài)(培養(yǎng)基顏色、細胞貼壁情況、形態(tài)與密度等)并拍照。 3.傳代： 細胞密度達80%-90%開始傳代 (1) 清洗：無菌下吸出培養(yǎng)基，用37 ℃預熱的PBS清洗一次; (2)消化：加1 mL 0.25%蛋白酶消化液，轉動培養(yǎng)瓶令其浸潤所有細胞，室溫 (或33.5℃)消化，顯微鏡下觀察到細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回超凈臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1 mL完全培養(yǎng)基終止消化； (3)離心：用移液器輕柔吹勻后然后將懸液轉移至10 mL離心管中，在1200 rpm離心3-5 min； (4)培養(yǎng)：無菌下棄上清液，加1 mL完全培養(yǎng)基懸起細胞并移至T25培養(yǎng)瓶中;按1：2-1：3比例添加完全培養(yǎng)基，用移液器輕柔吹勻后，分裝至培養(yǎng)瓶中，于33.5℃，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 |
| 生物安全等級 | 1請在無菌環(huán)境中操作，避免污染；為了保護細胞的穩(wěn)定性，細胞傳代次數(shù)不宜過多；為了結果的可靠性，實驗前請確認細胞狀態(tài)良好；嚴格遵守生物安全操作規(guī)程。 |
| 免責聲明 | 本產品僅用于科研目的，不得用于臨床診斷、治療等用途。用戶應遵循國家和地區(qū)的法律法規(guī)，自行承擔使用本產品所產生的一切風險和責任。請在使用前仔細閱讀本說明書，并按照指導操作。如有任何疑問或需要進一步信息，請與我們聯(lián)系。 |
產品詳情
人SV40轉染成骨細胞 (Human osteoblast cells) hFOB 1.19是在0.6mg/mL新霉素G418存在下，用溫度敏感的表達載體pUCSVisA58轉染自然流產的胎兒四肢組織建立的細胞系，細胞貼壁生長，呈現(xiàn)上皮樣，廣泛應用于建立成骨發(fā)育不全的病理模型、發(fā)病機制以及成骨細胞誘導分化等研。
