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產品概述
| 來源 | 外周血 |
|---|---|
| 形態 | 貼壁、成纖維樣 |
| 培養 | E-MEM培養基+10%FBS 37℃ 5%CO2 |
| 傳代 | 0.25%胰蛋白酶消化3-4min，比例1:2-1:4 |
| 產品簡介 | 1 請在無菌環境中操作，避免污染；為了保護細胞的穩定性，細胞傳代次數不宜過多；為了結果的可靠性，實驗前請確認細胞狀態良好；嚴格遵守生物安全操作規程。 |
| 收貨指南 | 1. T25細胞瓶到貨后處理方案： （1） 驗貨：培養瓶上標簽、培養瓶完好性以及瓶口是否有漏液； （2） 處置：75%酒精對培養瓶消毒后，放入37℃，5% CO2的培養箱靜置培養2-4小時后，進行顯微觀察、拍照，作為售后維權依據； （3） 注意：貼壁細胞在運輸過程中發生細胞脫落，這是正常現象，靜置后可恢復貼壁。 2. 凍存管到貨后處理方案： （1） 驗貨：包裝的標簽、包裝內是否有干冰、凍存管完好性； （2） 處置：盡快復蘇（見培養方法）或程序降溫后轉移至液氮中保存。 |
| 培養方法 | 1培養基： 89%MEM培養基，15%胎牛血清 (FBS)，1%青霉素-鏈霉素 (P/S)。 2.復蘇： (1)解凍:用銀子將凍存管浸于37℃水浴中;反復搖晃，迅速完成解凍； (2)離心:噴灑75%酒精消毒后，在無菌環境下，打開凍存瓶，用移液器將細胞連同凍存液移至含1mL完全培養基的10 mL離心管中，室溫1500 rpm離心3-5 min，細胞沉于離心管底部； (3)培養:將上清液輕輕棄去，加2 mL完全培養基，輕柔懸起細胞，然后將所有細胞懸液移至含有3mL完全培養基的T25培養瓶中，于37℃，5%CO2培養箱中培養； (4)觀察:每日觀察細胞生長狀態 (培養基顏色、細胞貼壁情況、形態與密度等) 并拍照。 3.傳代： 細胞密度達80%-90%開始傳代 (1)清洗:無菌下吸出培養基，用37℃預熱的PBS清洗一次; (2)消化: 加1 mL 0.25%胰蛋白酶消化液，轉動培養瓶令其浸潤所有細胞，室溫 (或37℃)消化顯微鏡下觀察到細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回超凈臺，輕敲幾下培養瓶后加1 mL完全培養基終止消化； (3)離心:用移液器輕柔吹勻后然后將懸液轉移至10 mL離心管中，1500 rpm離心3-5 min； (4)培養無菌下棄上清液，加1 mL完全培養基懸起細胞并移至T25培養瓶中按1:2-1:3比例添加完全培養基，用移液器輕柔吹勻后，分裝至培養瓶中，于37°C，5%CO培養箱中培養。 |
| 生物安全等級 | 1請在無菌環境中操作，避免污染；為了保護細胞的穩定性，細胞傳代次數不宜過多；為了結果的可靠性，實驗前請確認細胞狀態良好；嚴格遵守生物安全操作規程。 |
| 免責聲明 | 本產品僅用于科研目的，不得用于臨床診斷、治療等用途。用戶應遵循國家和地區的法律法規，自行承擔使用本產品所產生的一切風險和責任。請在使用前仔細閱讀本說明書，并按照指導操作。如有任何疑問或需要進一步信息，請與我們聯系。 |
產品詳情
