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首頁 > 細胞培養 > 細胞生物學(試劑) > 細胞專用完培 > 百迪人肝癌細胞 1×106cells/T25培養瓶
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產品概述

來源肝臟
形態貼壁、上皮細胞樣
培養高糖DMEM+10%FBS 37℃ 5%CO2
傳代0.25%胰蛋白酶消化3-5min,比例1:2-1:3
產品簡介人肝癌細胞 (hepatocellular carcinoma) HuH-7是一種高分化的肝癌細胞,取自一名57歲的日本男性的肝臟腫瘤組織,用于體外研究丙型肝炎病毒(HCV)和登革熱病毒的細胞模型。HuH-7/LUC-eGFP是將HuH-7用熒光蛋白標記構建的穩轉株,具有puromycin抗性,可在藥物篩選或癌癥研究起到識別并可視化細胞的作用。
收貨指南1. T25細胞瓶到貨后處理方案:
(1) 驗貨:培養瓶上標簽、培養瓶完好性以及瓶口是否有漏液;
(2) 處置:75%酒精對培養瓶消毒后,放入37℃,5% CO2的培養箱靜置培養2-4小時后,進行顯微觀察、拍照,作為售后維權依據;
(3) 注意:貼壁細胞在運輸過程中發生細胞脫落,這是正常現象,靜置后可恢復貼壁。
2. 凍存管到貨后處理方案:
(1) 驗貨:包裝的標簽、包裝內是否有干冰、凍存管完好性;
(2) 處置:盡快復蘇(見培養方法)或程序降溫后轉移至液氮中保存。
培養方法1.培養基:
89%高糖 DMEM 培養基;10% 胎牛血清(FBS);1%青霉素-鏈霉素(P/S)。
2.復蘇:
(1)解凍:用鑷子將凍存管浸于37℃水浴;反復搖晃,迅速完成解凍;
(2)離心: 噴灑75%酒精消毒后,在無菌環境下,打開凍存瓶,用移液器將細胞連同凍存液移至含1 mL完全培養基的10 mL離心管中,室溫1200 rpm離心3-5 min,細胞沉于離心管底部;
(3) 培養:將上清液輕輕棄去,加2 mL完全培養基,輕柔懸起細胞,然后將所有細胞懸液移至含有3 mL完全培養基的T25培養瓶中,于37℃,5% CO2培養箱中培養;
(4)觀察:每日觀察細胞生長狀態(培養基顏色、細胞貼壁情況、形態與密度等) 并拍照。
3.傳代:
細胞密度達80%-90%開始傳代
(1)清洗:無菌下吸出培養基,用37℃預熱的PBS清洗一次;
(2) 消化: 加1 mL 0.25%胰白酶消化液,轉動培養瓶令其浸潤所有細胞,室溫 (或37℃) 消化,顯微鏡下觀察到細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回超凈臺,輕敲幾下培養瓶后加1 mL完全培養基終止消化;
(3)離心: 用移液器輕柔吹勻后然后將懸液轉移至10 mL離心管中,在1200 rpm離心3-5 min;
(4)培養:無菌下棄上清液,加1 mL完全培養基懸起細胞并移至T25培養瓶中;按1: 2-1:3比例添加完全培養基,用移液器輕柔吹勻后,分裝至培養瓶中,于37℃,5% CO2,培養箱中培養。
生物安全等級1請在無菌環境中操作,避免污染;為了保護細胞的穩定性,細胞傳代次數不宜過多;為了結果的可靠性,實驗前請確認細胞狀態良好;嚴格遵守生物安全操作規程。
免責聲明本產品僅用于科研目的,不得用于臨床診斷、治療等用途。用戶應遵循國家和地區的法律法規,自行承擔使用本產品所產生的一切風險和責任。請在使用前仔細閱讀本說明書,并按照指導操作。如有任何疑問或需要進一步信息,請與我們聯系。

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