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產(chǎn)品分類
首頁 > 細(xì)胞培養(yǎng) > 細(xì)胞生物學(xué)(試劑) > 細(xì)胞專用完培 > 百迪人慢性髓系白血病細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶
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產(chǎn)品概述

來源骨髓
形態(tài)懸浮細(xì)胞
培養(yǎng)PRMI-1640培養(yǎng)基+10%FBS 37℃ 5%CO2
傳代比例1:2-1:3
產(chǎn)品簡介人慢性髓系白血病細(xì)胞(Human chronic myeloid leukemia cells)K-562最初分離于一名53歲患有慢性粒細(xì)胞白血病女性的胸腔積液,細(xì)胞具有分化潛能高、體外無限增殖的特點(diǎn)。K-562-Luc細(xì)胞通過慢病毒感染的方式可穩(wěn)定表達(dá)螢火蟲熒光素酶, puro 藥篩濃度為 0.5 ug/mL,培養(yǎng)過程中可不用再添加 puro,如若擔(dān)心抗性隨著傳代時(shí)間降低,可定期用 0.2 ug/mL濃度 puro 維持。K-562-Luc細(xì)胞可用作螢火蟲熒光素酶活性檢測中的陽性對照,也可用于活體動(dòng)物成像實(shí)驗(yàn)等研究。
收貨指南1. T25細(xì)胞瓶到貨后處理方案:
(1) 驗(yàn)貨:培養(yǎng)瓶上標(biāo)簽、培養(yǎng)瓶完好性以及瓶口是否有漏液;
(2) 處置:75%酒精對培養(yǎng)瓶消毒后,放入37℃,5% CO2的培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)后,進(jìn)行顯微觀察、拍照,作為售后維權(quán)依據(jù);
2. 凍存管到貨后處理方案:
(1) 驗(yàn)貨:包裝的標(biāo)簽、包裝內(nèi)是否有干冰、凍存管完好性;
(2) 處置:盡快復(fù)蘇(見培養(yǎng)方法)或程序降溫后轉(zhuǎn)移至液氮中保存。
培養(yǎng)方法1.培養(yǎng)基:
89% RPMI-1640培養(yǎng)基;10% 胎牛血清(FBS);1%青霉素-鏈霉素(P/S)。
2. 復(fù)蘇:
(1)解凍:用鑷子將凍存管浸于37 ℃水浴中;反復(fù)搖晃,迅速完成解凍;
(2)離心:噴灑75%酒精消毒后,在無菌環(huán)境下,打開凍存瓶,用移液器將細(xì)胞連同凍存液移至含1 mL完全培養(yǎng)基的10 mL離心管中,室溫1200 rpm離心3-5 min,細(xì)胞沉于離心管底部;
(3)培養(yǎng):將上清液輕輕棄去,加2 mL完全培養(yǎng)基,輕柔懸起細(xì)胞,然后將所有細(xì)胞懸液移至含有3 mL完全培養(yǎng)基的T25培養(yǎng)瓶中,于37 ℃,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
(4)觀察:每日觀察細(xì)胞生長狀態(tài)(培養(yǎng)基顏色、形態(tài)與密度等)并拍照。
3. 傳代:
細(xì)胞密度達(dá)80%-90%開始傳代
(1)收集細(xì)胞,1200 rpm離心3-5 min,無菌下棄上清液;
(2)加1 mL完全培養(yǎng)基懸起細(xì)胞,補(bǔ)充至3 mL( 1∶ 3傳代)并反復(fù)吹打使細(xì)胞混勻、不聚團(tuán);
(3)分裝至3個(gè)T25培養(yǎng)瓶中,每瓶再補(bǔ)充完全培養(yǎng)基至5 mL,于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
生物安全等級(jí)1請?jiān)跓o菌環(huán)境中操作,避免污染;為了保護(hù)細(xì)胞的穩(wěn)定性,細(xì)胞傳代次數(shù)不宜過多;為了結(jié)果的可靠性,實(shí)驗(yàn)前請確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好;嚴(yán)格遵守生物安全操作規(guī)程。
免責(zé)聲明本產(chǎn)品僅用于科研目的,不得用于臨床診斷、治療等用途。用戶應(yīng)遵循國家和地區(qū)的法律法規(guī),自行承擔(dān)使用本產(chǎn)品所產(chǎn)生的一切風(fēng)險(xiǎn)和責(zé)任。請?jiān)谑褂们白屑?xì)閱讀本說明書,并按照指導(dǎo)操作。如有任何疑問或需要進(jìn)一步信息,請與我們聯(lián)系。

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