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首頁 > 分子生物 > 分子生物學(試劑) > 核酸檢測試劑 > 核酸抽提純化試劑 > 索萊寶質粒小量提取試劑盒D1100
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產品簡介

本試劑盒采用堿裂解法裂解細胞,根據離心吸附柱在高鹽狀態下特異性地結合溶液中的DNA的原理特異性提取質粒DNA。 離心吸附柱中采用的硅基質材料能高效、專一地吸附DNA,可最大限度去除雜質蛋白及細胞中其他有機化合物。 使用本試劑盒提取的質粒DNA可適用于各種常規操作,包括酶切、PCR、測序、連接和轉化等試驗。
?使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶體上的標簽。溶液Ⅰ在使用前先加入RNaseA(將試劑盒中提供的 RNaseA 全部加入),混勻,置于 2-8℃保存。如非指明,所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。
試劑盒提取植物dna已經獲得廣泛應用。各個生化試劑廠家也都有了dna提取試劑盒產品。索萊寶作為國內知名生化試劑供應商提供了各類dna提取試劑盒。今天給大家介紹試劑盒提取植物dna步驟。當然是以索萊寶產植物基因組dna提取試劑盒產品為例。

使用方法

使用前先在漂洗液中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶體上的標簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。

1、植物組織預處理:取新鮮植物組織(不超過 100mg)或干重組織(不超過 20mg),于液氮中充分研磨至細粉狀,讓液氮自然揮發。

2、將研磨好的植物組織粉末迅速轉移到預先裝有 400ul 溶液 A、20ul RNase A(10mg/ml)和 5ul β-巰基乙醇的離心管中,充分顛倒混勻,室溫放置 10min。

3、加入 140ul 溶液 B,充分顛倒混勻,12000rpm 離心 10min,將上清轉移至新離心管(約 400-500ul),注意不要吸入沉淀。

4、加入和上清相同體積的溶液 C,充分顛倒混勻,再加入和溶液 C 相同體積的無水乙醇,此時若出現絮狀物,將絮狀物吹散后一起加入吸附柱中,12000rpm 離心 5min,棄廢液,一次加不完可分兩次加入。

注意:如果吸附柱膜呈綠色或離心時有堵塞現象,可向吸附柱中加入 600ul 無水乙醇,并適當延長離心時間。

5、 向吸附柱中加入 600ul 漂洗液(請先檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm 離心 1min,棄廢液,將吸附柱放回收集管。

6、向吸附柱中加入 600ul 漂洗液,12000rpm 離心 1min,棄廢液,將吸附柱放回收集管中, 12000rpm 離心 2min。

7、將吸附柱置于室溫或 50℃溫箱放置數分鐘,否則殘余的乙醇可能會影響后續的實驗如酶切、PCR 等。

8、將吸附柱放入一個干凈的離心管中,向吸附膜中央懸空滴加 50-200ul 經 65℃水浴預熱的洗脫液,室溫放置1-5min,12000rpm 離心 2min,即可得到高質量的植物基因組 DNA。

9、(可選)離心所得洗脫液再加入吸附柱中,室溫放置 2min,12000rpm 離心 2min。

以上是索萊寶植物基因組dna提取試劑盒使用步驟。如果還有不理解可以聯系索萊寶技術支持部分獲取幫助。


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