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產品簡介
本試劑盒適用于各種 RNA制品的反轉錄反應。它采用M-MLV進行反轉錄反應，能夠獲得較長的反轉錄產物用于后續的PCR擴增和分子克隆實驗。
本試劑盒中配置的酶為進口的酶。RT酶采用進口的M-MLV，所以cDNA更長，基因的信息保留得更完整！反轉錄過程中特異的RNase抑制劑可有效降低由于外源RNase污染而導致實驗失敗的風險。本試劑盒使用方便、快捷，可廣泛用于cDNA克隆及目的基因檢測等分子生物學實驗。
注意事項：
1、 用于cDNA合成反應的相關試劑和耗材盡可能用DEPC進行處理，并在高壓滅菌后使用。有些試劑不能高壓滅菌時，首先用經過滅菌的器具、水等配制溶液后，再將溶液進行過濾除菌處理。
2、 試劑盒的各組分應在-20℃保存，避免反復凍融，有效期12個月。
3、 RNA樣品要避免反復多次凍融，應使RNA在冰浴中處于融化狀態。
操作步驟
一、反轉錄反應
1、在冰浴的無 RNase 的離心管中加入如下反應成分：
1-5μg 總 RNA 或 50-500ng mRNA
2μL Oligo(dT)16或 2 pmole 基因特異性引物
補 RNase-free ddH2O 至 14.5μL
2、70℃保溫 5min 后迅速在冰上冷卻 2min，簡短離心收集反應液后加入以下各組分：
4μL 5×M-MLV Buffer
1μL dNTPs
0.5μL RNasin
1μL M-MLV
3、42℃溫浴 60min，如果是用隨機引物，請先將離心管置 25℃溫浴 10min，再 42℃溫浴 60min。
4、95℃加熱 5min 終止反應，置冰上進行后續實驗或-20℃保存。
5、若用于后續 PCR 擴增,用 RNase-free ddH2O 將反應體系稀釋到 50μL，取 2-5μL 作為 PCR 反應模板。
注意事項：
1、用于 cDNA 合成反應的相關試劑和耗材盡可能用 DEPC 進行處理，并在高壓滅菌后使用。有些
試劑不能高壓滅菌時，首先用經過滅菌的器具、水等配制溶液后，再將溶液進行過濾除菌處理。
2、試劑盒的各組分應在-20℃保存，避免反復凍融，有效期 12 個月。
3、RNA 樣品要避免反復多次凍融，應使 RNA 在冰浴中處于融化狀態。
