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產品簡介

IPTG 為安慰性誘導物,X-gal 為生色底物,二者共同用于藍白斑篩選。IPTG 可誘導載體 Lac 操縱子 DNA 區
段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段,該片段可與宿主細胞編碼的缺陷型β-半乳糖苷酶實現基因內互補(α互補)。實現α
互補的細菌鋪在含有 X-gal 生色底物的培養基上,可形成藍色菌落。外源 DNA 插入質粒的多克隆位點后可破壞α
互補作用,將產生白色菌落。IPTG 也是常用的基因工程中重組蛋白表達的誘導劑。
此產品為 IPTG 用雙蒸水溶解過濾后配成的無菌溶液。
使用說明
蛋白表達誘導:50mg/mL 濃度為 210mM。如果終濃度要求為 0.5mM,則每升培養基中加入 2.38mL IPTG 溶
液 (50mg/mL)。如果實驗中需要使用其他誘導濃度,可自行計算加入量。
藍白斑篩選:
(1)在 100mL 的瓊脂培養基中,加入 500μL 的 X-gal 溶液(20mg/mL)、250μL 的 IPTG 溶液(50mg/mL)
和 100 μL 的 Amp(氨芐青霉素,100 mg/mL),制作成含 X-Gal、IPTG 和 Amp 平板培養基。高壓滅菌后的培養基
需冷卻至 55℃以下時加入 X-Gal、IPTG 和 Amp,以防失活。
(2)實際上 X-gal 和 IPTG 可以直接涂抹在平板培養基表面, 90mm 的平板,X-gal(20mg/mL)涂 40μL,
IPTG(50mg/mL)涂 16μL。150mm 的平板加倍使用量,待涂布的液體干后就可以使用。細菌鋪板后,37℃培養
過夜,可根據長出菌體的藍白色,而方便地挑選出基因重組體(白色菌落為具有 DNA 插入片段的基因重組體)。
注意事項
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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