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首頁 > 蛋白與免疫 > 免疫組化相關耗材 > 試劑 > 組織細胞固定液 > 檸檬酸鈉抗原修復液(50×)C1032
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產品簡介

細胞或組織用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后,會導致細胞內抗原形成醛鍵、羧甲鍵而被封閉了部
分抗原決定簇,同時蛋白之間發生交聯而使抗原決定簇隱蔽,導致免疫染色時染色信號減弱,甚至出現一些假
陰性染色結果。所以要求在進行免疫組化染色時,需要先進行抗原修復或暴露,即將固定時分子之間所形成的
交聯破壞,而恢復抗原的原有空間形態。從而提高抗原的檢出率,降低背景染色,提高檢測的準確性。
檸檬酸鈉抗原修復液(Citrate Antigen Retrieval solution,50×)是一種常用的抗原修復液,可以用于石蠟切片、
冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復。可以有效去除醛類固定試劑導致的蛋
白之間的交聯,充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位,從而大大改善免疫染色效果。
通常石蠟切片都需進行抗原修復處理,而冰凍切片可以不進行抗原修復處理。抗原修復可以提高石蠟切片的
免疫染色效果,亦可以不同程度的提高冰凍切片的染色效果。當冰凍切片免疫染色效果不理想時,考慮進行抗
原修復。
按照每個片子需要 10ml 抗原修復液(1×)計算,100ml 抗原修復液(50×)可以用于 500 個樣本的抗原修復。
使用方法
本產品是 50×的濃縮液,使用之前按需要量用去離子水或雙蒸水稀釋至 1×。
1. 對于石蠟切片:
a. 脫蠟:二甲苯 3 次,每次 3-5min→ 無水乙醇 2 次,每次 3-5min→ 95%乙醇 1 次,3-5min→ 90%乙醇 1
次,3-5min→ 75%乙醇 1 次,3-5min→ 蒸餾水洗 2 次,每次 3-5min。
b. 抗原修復:將切片浸泡在抗原修復液(1×)中,95-100℃加熱約 15 min (加熱時間可以控制在 10-20 min
內,最佳的加熱時間需根據不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復液(1×)使用前需預熱到 95-100℃。加
熱可以使用普通的水浴鍋,也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱,需注意避免暴沸和過多的水分蒸發。
隨后大約在 20-30 min 內冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次,每次 3-5 min。隨后即可進行封閉等后續
的免疫染色步驟。
2. 對于冰凍切片:
用免疫染色洗滌液洗滌切片 5 min。將切片浸泡在抗原修復液(1×)中,95-100℃加熱約 15 min (加熱時間可
以控制在 10-20 min 內,最佳的加熱時間需根據不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復液(1×)使用前需預
熱到 95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋,也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱,需注意避免暴沸
和過多的水分蒸發。隨后大約在 20-30 min 內冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次,每次 3-5 min。隨后
即可進行封閉等后續的免疫染色步驟。
3. 對于其它樣品的抗原修復,可以參考石蠟切片或冰凍切片的步驟進行。
注意事項:
抗原修復過程可以使用索萊寶的的抗原修復盒進行操作。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴手套操作。

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