產品簡介：

DiD，DiO，DiI和DiR染料是一族親脂性的熒光染料，可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結構。當與細胞膜結合后其熒光強度大大增強，這類染料有著很高的淬滅常數和激發態壽命。一旦對細胞染色，這類染料在整個細胞膜上擴散，最佳濃度時可以使整個細胞膜染色。它們的熒光顏色區分明顯：DiI（紅色熒光），DiO（綠色熒光），DiD（遠紅外熒光）和 DiR （深紅色熒光），這使得他們可以用來對活細胞進行多色成像和流式分析。

DiD是DiI的類似物，但具有更長的激發和發射波長，為遠紅外熒光，在一些細胞和組織染色中更有優勢，特別適合用于進行多種熒光的同時染色。DiD可被633nm的氦-氖激光所激發，DiD在進入細胞膜之前熒光非常弱，僅當進入到細胞膜后才可以被激發出很強的熒光。DiD被激發后可以發出遠紅外的熒光，最大激發波長為644nm，最大發射波長為663nm。

DiD被廣泛用于正向或逆向的，活的或固定的神經等細胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑。還用于檢測細胞的融合和粘附，檢測發育或移植過程中細胞遷移，通過FRAP檢測脂在細胞膜上的擴散，檢測細胞毒性和標記脂蛋白等。

DiD染色后可以兼容免疫熒光實驗。建議使用免疫染色通透液(Saponin)或使用洋地黃皂苷配制的不會溶解細胞膜的通透液進行通透，其它去垢劑配制的通透液可能會溶解細胞膜上的脂類物質，造成DiD失去結合位置，最終導致DiD的染色失效。但通透也可能會影響DiD在細胞膜上的定位并會增加細胞內的染色，具體實驗中需根據實驗的需求選擇合適的細胞通透液。

產品信息：

英文名：DiIC18(5); 1,1'-Dioctadecyl-3,3,3',3'-Tetramethylindodicarbocyanine Perchlorate

分子式：C61H99ClN2O4

分子量：959.91

純度：≥95%

使用方法（僅供參考）：

一、DiD細胞膜染色液制備

1．配置DMSO或EtOH 儲存液：用DMSO或EtOH配置濃度1-5 mM的儲存液。

2．工作液制備：用合適的緩沖液（如無血清培養基，HBSS或PBS）稀釋儲存液，配制濃度為1-5 μM的工作液。

注：工作液的最終濃度是根據不同細胞和實驗的經驗來配制，可以從推薦濃度的十倍以上尋找最佳條件。  

二、細胞染色

a.對于懸浮細胞

1．懸浮細胞密度為1×106/mL加入到工作液中。

2．在37℃培養細胞5～20分鐘，不同的細胞最佳培養時間不同。

3．1000-1500rpm離心5分鐘。

4．去除上清，再次緩慢加入37℃預溫的培養液。

5．重復步驟3和4，兩次以上。

b.對于貼壁細胞

1．吸去多余的培養液。

2．加入染料工作液，輕輕晃動使染料均勻覆蓋所有細胞。

3．在37 ℃培養細胞 5～20分鐘，不同的細胞最佳培養時間不同。

4．吸去染料工作液，用培養液清洗2～3次，每次用預溫的培養基覆蓋所有細胞，培養5～10分鐘，然后吸干培養基。

三、結果分析

顯微鏡下觀察或流式細胞儀檢測

注意事項：

1、熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。

2、本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。

3、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

保存條件：

-20℃干燥避光保存，有效期一年。