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首頁 > 分子生物 > 蛋白與免疫 > 免疫組化相關耗材 > 試劑 > 白鯊0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA、酚紅,溶于D-Hank's)
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胰蛋白酶(Trypin)是一種絲氨酸水解酶,它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側切段,水解細胞間的蛋白質,破壞細胞間的連接,從而使組織或貼壁細胞離散成單個細胞。胰酶分散細胞的活性與組織或細胞的特性、胰酶濃度、溫度和作用時間有關,在PH 8.037℃時,胰酶的作用能力最強,因此使用胰酶時,應把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細胞損傷。

一般常用胰酶的工作濃度為0.25%,而半貼壁細胞或對胰酶敏感的細胞常采用低濃度(0.05%)的胰酶進行細胞消化。由于EDTA能夠螯合Ca2+Mg2+,從而破壞細胞連接促進細胞的解離,因此在胰酶溶液中常常會加入一定量的EDTA混合使用,以增強解離效果。

注意事項

1、由于不同的組織或者細胞對胰酶的作用反應不一樣,因此操作人員應根據實際情況,確定最佳消化時間;消化細胞時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁和生長狀況;

2、使用本產品時應注意無菌操作,避免污染;

3、不宜長時間放置于室溫環境或4℃長期保存;

42℃~8℃中解凍,搖勻后使用,切忌反復凍融,用量較少時建議分裝凍存。

5、由于D-Hank's平衡鹽溶液NaHCO3含量較低(0.35g/L),因此該型胰蛋白酶溶液不能用于5% CO2的環境,若放入CO2培養箱,溶液將迅速變酸,使用時應注意;

6、本產品中含有酚紅且采用干冰運輸,因此在運輸過程中包裝內會有部分二氧化碳累積,這些二氧化碳可能會進入到溶液中導致PH略微下降,從而導致溶液顏色由粉紅色變成橙色。該種橙色的溶液依然可以使用或者也可以采用無菌的2M氫氧化鈉溶液對PH進行微調后使用;

7、本產品僅用于科研或進一步研究使用,不用于診斷和治療。


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