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| ■ 制品內容(Code No. 3281) |
| Cell Lysate＊1100 μlMixture-1 60 μlMixture-2＊210 μlMixture-3＊220 μlT7 RNA Polymerase (200 U/μl) 10 μlpT7-IRES Vector (0.5 μg/μl)20 μlControl Vector＊3 (0.3 μg/μl)5 μl |
| *1 現用現融解，使用微量移液器輕輕混合均勻并迅速使用，使用完畢立即置于-80℃保存。 注：雖然5次反復凍融基本不會造成產品性能下降，但建議小量分裝保存。 *2 Mixture-2和Mixture-3中均含有蛋白質，其中Mixture-2中含有HN標簽蛋白質，因此應避免劇烈攪拌或振蕩。 *3 該質粒在pT7-IRES中插入了β-半乳糖苷酶基因。 |
| ■ 制品說明 |
| Human Cell-Free Protein Expression System是利用人源細胞提取物的無細胞蛋白質合成系統。本系統中的Cell Lysate包含了所有體外蛋白質合成的必需因子(核糖體、翻譯起始/延伸因子和tRNA等)。只需將攜帶靶基因的pT7-IRES Vector、T7 RNA Polymerase、Mixture-3(氨基酸和ATP等)和Mixture-2(翻譯增強因子)加入到Cell Lysate中，就可以在一個反應管中完成從RNA轉錄到蛋白質合成的反應，操作十分簡單。本制品具有反應體系小、反應速度快、可合成無細胞蛋白質的優點。 pT7-IRES Vector轉錄得到的目的RNA含有IRES序列，這段序列能夠增強蛋白質翻譯的起始。反應液中添加了翻譯增強因子，在蛋白質合成過程中，它能夠活化Cell Lysate中無活性的翻譯起始因子，從而維持了穩定的翻譯水平。本系統不僅提高了蛋白質合成的效率，彌補了哺乳類無細胞蛋白質合成系統翻譯水平低的缺陷，而且能夠合成超過150 kDa的高分子量蛋白質。 本系統適用于高通量的蛋白質合成反應，只需一步即可完成。由于毒性蛋白會抑制宿主細胞生長和功能，導致很難利用活細胞表達系統來合成毒性蛋白質，所以本系統尤其適用于合成毒性蛋白質。 * 3290/3291/3292與3281搭配使用，可表達帶有His標簽或Myc標簽的蛋白質。 ■ 保存3281：-80℃；3290、3291、3292：-20℃。 |
| ■ pT7-IRES Vector 的結構 |
 |
| HumanCell-FreeProteinExpressionSystem | |||
| 品牌 | CodeNo. | 產品名稱 | 包裝量 |
| Takara | 3281 | HumanCell-FreeProteinExpressionSystem | 10次 |
| Takara | 3290 | pT7-IRESHis-NDNA | 20μg |
| Takara | 3291 | pT7-IRESHis-CDNA | 20μg |
| Takara | 3292 | pT7-IRESMyc-NDNA | 20μg |
