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| ■ 制品內容 (200 次量) |
| Solution A20 mlSolution B20 ml |
| ■ 制品說明 |
| 大腸桿菌經過處理后可以攝取外源DNA (Plasmid DNA、Phage DNA等)，處于這種狀態的細胞稱為感受態細胞 (Competent Cell)。在基因工程實驗中，經常要使用各種感受態細胞進行DNA的轉化操作。實驗使用的感受態細胞的來源大體可以分為兩種：一種是購買商品化的感受態細胞，但商品化感受態細胞成本高、運輸及保存有一定困難 (超低溫)；另一種是自己制備感受態細胞，實驗人員自己制作感受態細胞時，往往受到各種試劑及實驗條件等限制，制備的感受態細胞效率低，達不到實驗要求。Competent Cell Preparation Kit是一種方便、高效、快速制備感受態細胞的試劑盒。使用本試劑盒制備的感受態細胞可以滿足大多數實驗的需要，并且適用于大多數常用的大腸桿菌，例如：E.coli DH5α、JM109、CJ236、HB101、MV1184、BMH71-18mutS等，轉化效率均可以達到1×106 cfu/μg pUC19以上 (轉化效率根據大腸桿菌細胞系及轉化用DNA不同稍有差異)。使用本試劑盒制備的感受態細胞可以在-80℃保存一年。 ■ 保存4℃。 |
| ■ 注意事項 |
| 1. 制作感受態細胞時應使用專用的玻璃器皿或塑料容器。洗刷這些玻璃器皿或塑料容器時應盡量洗凈。由于微量的洗滌劑或污染物都可能降低感受態細胞的轉化效率，因此在洗刷完用于制作感受態細胞的專用玻璃器皿或塑料容器后，建議用去離子水浸泡一晚，然后再充分洗凈。 2. 制作感受態細胞時使用的菌種，不應使用4℃或常溫保存的傳代細菌。應使用-70℃保存的菌種，在LB/抗生素平板培養基上分級劃線培養后，挑取單菌落。使用這種菌種制作的感受態細胞，能提高轉化效率。 3. 培養感受態細胞制備用菌體時，OD600值的測定應隨時進行，以使OD600值控制在0.35～0.5之間。如果OD600值超出此范圍，可能降低感受態細胞的轉化效率。 4. 用于感受態細胞制備的菌體培養停止后要立即處理，不要將培養液過長時間室溫放置，在冰中放置時也不要時間過長。 5. 感受態細胞的制備操作過程中，離心后棄上清時要盡量棄盡，否則會降低感受態細胞的轉化效率。 6. 使用Solution A、Solution B懸浮沉淀時要用手指輕輕彈動Microtube管壁，禁止劇烈振蕩操作。 7. 為了有效確認感受態細胞的轉化效率，建議制作一批高純度的質粒DNA分裝低溫 (-20℃) 保存，用作陽性對照，以確認每批制作的感受態細胞的轉化效率。 |
| CompetentCellPreparationKit | |||
| 品牌 | CodeNo. | 產品名稱 | 包裝量 |
| Takara | 9139 | CompetentCellPreparationKit | 200次 |
