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| ■ 制品內容 (25 μl × 50次量) |
| 2X Cycleave Reaction Mixture (2X conc.)625 μlSIN Primer/Probe Mix (FAM、ROX標記) (5X conc.)*250 μldH2O1 mlSIN Positive Control150 μl (30次反應量) * 含熒光標記探針，應避光保存。引物由SHIMADZU CORPORATION生產制造。 Limited Use Label License: [M40], [M46], [L4] |
| ■ 制品說明 |
| 沙門氏菌 (Salmonella) 是與E.Coil 和Shigella同屬于一群的重要腸道致病菌，這一類細菌在自然界中分布很廣，其中有2,500多種被確認為血清型。近年來由于Salmonella Enteritidis引起的食物中毒急劇增加。 本制品是對大部分沙門氏菌都具有的基因－侵襲蛋白A (invasion protein A，invA) 基因進行快速、準確檢出的Real Time PCR試劑盒。在PCR反應中每個循環包括三個過程：模板變性、引物退火、聚合酶作用下的延伸，該反應可以實現目的基因的指數倍擴增，使用Real Time PCR可實時監測擴增過程。 制品中使用了改良后的Hot Start法用DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq HS，可防止在循環反應前因引物錯配、引物二聚體所產生的非特異性擴增。 該檢測使用了Cycling Probe法。Cycling Probe法是由RNA和DNA構成的雜合探針與RNase H組合使用的高靈敏度檢出法，能夠高效率地檢出擴增過程中及擴增結束時的目的基因片段。Cycling Probe內部含有RNA堿基，一端標記熒光物質，另一端標記熒光淬滅物質，當探針處于完整狀態時，由于熒光淬滅作用抑制熒光物質發出熒光，但當探針與擴增產物中的互補序列雜交后，RNase H在RNA部分將探針切斷，淬滅抑制作用解除，熒光物質發出熒光，通過測定熒光強度，能夠實時監控擴增產物量。 制品中檢測沙門氏菌invA基因的探針熒光物質使用了FAM標記，內參照檢測用探針的熒光物質使用了ROX標記，在同一反應管內對沙門氏菌invA基因及內參照 (Internal Control) 同時進行擴增，通過兩種不同熒光標記探針可以對invA基因和內參基因同時檢定，實現雙通道同步檢測。其中，對內參照反應的檢測，可以監控反應是否正常進行，防止假陰性結果的產生。本檢測無需電泳，簡單快速，靈敏度高、特異性強。 |
| ■ 保存 |
| -20℃。 |
| ■ 注意事項 |
| 1. Real Time PCR儀的使用請按照說明書進行。 2. 如果雜合探針、引物因混入核酸酶而被降解，則不能準確進行檢測。實驗者的汗液和唾液也會帶入核酸酶，操作時應注意。 3. PCR反應是靈敏度非常高的反應。為防止污染，建議從反應液的配制到檢測的實驗過程中，設定以下3個實驗區域，并進行物理性隔離。 |
| 區域1：反應液的配制及分裝。區域2：檢測樣品的制備。區域3：向反應液中添加檢測樣品，進行反應、檢出。由于本制品使用Real Time PCR法，擴增反應與檢測同時進行，反應后的擴增產物不需要再進行電泳。為了避免污染，嚴禁從Tube管中取出擴增產物。 |
| 4. 使用本制品獲得的結果是以Real Time PCR儀的分析為基礎來判定的。如果Real Time PCR儀的任一功能出現問題都可能導致錯誤的判定結果，因此，要依據儀器說明書來正確設置Real Time PCR儀。 |
| CycleavePCR?SalmonellaDetectionKitVer.2.0 | |||
| 品牌 | CodeNo. | 產品名稱 | 包裝量 |
| Takara | CY205 | CycleavePCR?SalmonellaDetectionKitVer.2.0 | 50次 |
