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商品名稱：PrimeScript II High Fidelity One Step RT-PCR Kit
商品編號(hào)：SPU2021050495
上架時(shí)間：2022-01-06
| ■ 制品內(nèi)容 (Code No.: R026A) |
| PrimeScript II RT Enzyme Mix50 μlPrimeSTAR GXL for 1 step RT-PCR200 μl2 × One Step High Fidelity Buffer625 μl × 2Control F-1 Primer*1 (20 μM)10 μlControl R-1 Primer*2 (20 μM)10 μlPositive Control RNA (2×105 copies/μl)20 μlRNase Free dH2O625 μl × 2 *1 Positive Control RNA用上游引物。*2 Positive Control RNA用下游引物。 |
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| 圖1. Control RNA: 使用Control Primer時(shí)擴(kuò)增的DNA片段 |
| ■ 制品說明 |
| PCR（Polymerase Chain Reaction；聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是一種使用兩種引物擴(kuò)增目的DNA的方法。雖然原理上PCR法是擴(kuò)增DNA，RNA不能直接被擴(kuò)增，但是經(jīng)過反轉(zhuǎn)錄酶的作用將RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA后擴(kuò)增（RT-PCR），PCR法便可應(yīng)用于RNA的解析了。目前，此方法已廣泛應(yīng)用于RNA的構(gòu)造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表達(dá)解析等多種領(lǐng)域。PrimeScript II High Fidelity One Step RT-PCR Kit是在一個(gè)反應(yīng)管中連續(xù)進(jìn)行反應(yīng)的1 step RT-PCR用試劑盒。反轉(zhuǎn)錄酶使用延伸性能好且能夠合成全長cDNA的PrimeScript II RTase，PCR使用準(zhǔn)確性高且適于擴(kuò)增長鏈及GC Rich cDNA的PrimeSTAR? GXL DNA Polymerase，這兩種酶經(jīng)優(yōu)化后可用于1 step RT-PCR。本試劑盒可用于寬泛濃度RNA起始的反應(yīng)，在反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)10分鐘、PCR反應(yīng)延伸時(shí)間為10秒/kb的高速條件下，能夠擴(kuò)增難擴(kuò)增的長鏈及GC rich等各種目的基因，可簡(jiǎn)便快速且準(zhǔn)確地獲得cDNA產(chǎn)物。本試劑盒具有以下優(yōu)點(diǎn)：· 使用單管反應(yīng)，降低污染的風(fēng)險(xiǎn)，可準(zhǔn)確且簡(jiǎn)便地?cái)U(kuò)增RNA起始的目的基因。· 反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)只需10分鐘，PCR延伸時(shí)間達(dá)10秒/kb的高速反應(yīng)。· 可擴(kuò)增GC rich、長鏈cDNA。· 反應(yīng)中total RNA的使用量范圍廣，易于使用。本試劑盒含有RNA起始合成cDNA及經(jīng)PCR擴(kuò)增cDNA所需的全部試劑。 ■ 保存-20℃。 |
| ■ 試劑盒特點(diǎn) |
| RNA模板 適用于所有RNA 擴(kuò)增片段大小 ～8 kb 反轉(zhuǎn)錄酶 PrimeScript II RTase (使用溫度45℃) DNA Polymerase PrimeSTAR GXL for 1 step RT-PCR RNase Inhibitor 必須使用 (PrimeScript II RT Enzyme Mix 中含有)1st strand cDNA合成用引物 使用特異性下游引物 (PCR擴(kuò)增反應(yīng)用反義鏈引物) (不可使用 Random 6 mers 及 Oligo dT Primer) 操作 在一個(gè)反應(yīng)管中連續(xù)的進(jìn)行RT-PCR反應(yīng) |
| ■ 使用注意 |
| 以下為使用本試劑盒時(shí)的注意事項(xiàng)，使用前一定認(rèn)真閱讀。 |
| 1. 當(dāng)同時(shí)需要進(jìn)行多個(gè)RT-PCR 反應(yīng)時(shí)，應(yīng)先配制各種試劑的混合液（Master Mix；其中包括 RNase Free dHH2O、Buffer、dNTP Mixture 等），然后再分裝到每個(gè)反應(yīng)管中。這樣，可使所取的試劑體積更準(zhǔn)確，減少試劑損失，避免重復(fù)分取同一試劑。同時(shí)也可以減少實(shí)驗(yàn)操作或?qū)嶒?yàn)之間產(chǎn)生的誤差。 2. 使用PrimeScript II RT Enzyme Mix、PrimeSTAR GXL for 1 step RT-PCR等酶類產(chǎn)品時(shí)，應(yīng)輕輕混勻，避免起泡；分取之前要小心地離心收集到反應(yīng)管底部；由于酶保存液中含有50%的甘油，粘度高，分取時(shí)應(yīng)慢慢吸取。 3. 2 × One Step High Fidelity Buffer使用前需充分vortex后，離心備用。 4. 酶制品應(yīng)在實(shí)驗(yàn)前才從-20℃中取出，使用后也應(yīng)立即放入-20℃保存。 5. 為了防止Positive Control RNA分解，應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融，建議將其分成小包裝后凍存。有條件的實(shí)驗(yàn)室最好保存于-70℃～-80℃。 6. 分裝試劑時(shí)務(wù)必使用新的槍頭（Tip），以防止樣品間污染。 7. 本試劑盒的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)使用基因特異性引物。不要使用Random Primer或Oligo-dT Primer。 |
| PrimeScript?IIHighFidelityOneStepRT-PCRKit | |||
| 品牌 | CodeNo. | 產(chǎn)品名稱 | 包裝量 |
| Takara | R026A | PrimeScript?IIHighFidelityOneStepRT-PCRKit | 50次 |
| Takara | R026B(A×4) | PrimeScript?IIHighFidelityOneStepRT-PCRKit | 200次 |
400-0592-051
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