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C18柱的規格對色譜柱的影響
柱填料的選擇關系到色譜分離的可能性,而柱規格的選擇直接影響分析速度、分離能力、檢測能力及每次分析的溶劑消耗等。柱規格包括兩方面:柱內徑和柱長度。柱內徑,分析型一般為2~6 mm,制備型20 mm,大者可達80 mm;柱長度,分析型5~30 cm,制備型15~50 cm。一般來說,柱內徑不影響分離度與分析時間的關系。今天,柱技術已發展到不同柱內徑的柱子能夠具有相同的性能。不同內徑的柱子又各具特點,對相同的分析時間和分離度來說,內徑大的柱子比內徑小的柱子多消耗溶劑。另一方面,較小內徑的柱子對相同的檢測信號來說所需樣品量亦較少。因此,在樣品量有限時,可使用小內徑柱。柱長度增加雖可改善分離效果,但阻力也隨之增加,必須提高入口壓力。柱壓是同時影響增加分離度和減少分析時間的主要障礙。分離度、分析時間及柱壓三者相互制約,選擇好其中兩者,則第3個因素也就選好了。長柱可以給出高分離度,短柱可提供快速分離,我們可以根據樣品情況去選用合適的色譜柱。
3. C18柱選用的基本原則
(1) 選用經過烷基化處理封口的填料可防止堿性化合物的拖尾現象。
(2)選用含碳量高的柱子,增加保留值。
(3)選用較短的柱子(如15 cm,7.5 cm)。
(4)選用小顆粒度的填料。
(5)對分子量大的組分選用大孔徑填料的柱子。
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